![]() |
|
сделать стартовой | добавить в избранное |
![]() |
Диагностика стафилококковых инфекций |
Диагностика стафилококковых инфекций Выполнил: Новак А.Л., 301 гр., л/ф, Владивосток, 1998. Предисловие Несмотря на то, что стафилококки принадлежат к числу наиболее легко обнаруживаемых и распознаваемых микроорганизмов, не требующих сложных диагностических приемов для их выявления, в практической работе микробиологи до сих пор испытывают определенные трудности при установлении их причинной роли в ряде различных заболеваний. С одной стороны, присутствие патогенных стафилококков, обнаруживаемое в исследуемом материале, не всегда является убедительным доказательством их этиологического значения. С другой, учитывая большое разнообразие проявлений биологической активности этих микробов, зависящее от разных, не всегда поддающихся учету факторов, широкую их изменчивость под влиянием лекарственных веществ и самого макроорганизма, довольно сложно бывает определить их потенциальную патогенность. Наконец, третья причина связана с тем, что стафилококки являются представителями нормальной микрофлоры из группы условно патогенных микроорганизмов и, наряду с непатогенными, патогенные представители обитают в организме людей, распространяясь при этом весьма неравномерно на разные участки человеческого тела. Если выделение патогенного стафилококка, из крови больных людей и различных полостей, которые принято считать стерильными, в подавляющем большинстве случаев может служить доказательством его роли как возбудителя болезни, то присутствие стафилококков на слизистых зева, носа и т. д. даже при явном болезненном состоянии их требует большой осторожности исследователя в выводах об этиологии данных заболеваний. Поэтому, естественно, не может быть общих рекомендаций, как при диагностике различных стафилококковых инфекций, так и при микробиологических исследованиях участков тела человека и разных объектов внешней среды. Широкий обмен мнениями между микробиологами научных учреждений и практических лабораторий, осуществляемый на съездах и конференциях, посвященных проблемам стафилококковых инфекций, а также при личных контактах, казалось бы, должен был привести к определенным взглядам на различные методы исследования, предлагаемые для выделения и идентификации стафилококков. Однако большое число запросов, поступающих из лабораторий СЭС и лечебных учреждений, свидетельствует о явных затруднениях, которые возникают у исследователей при решении разных вопросов микробиологической диагностики стафилококков, а в ряде микробиологических учреждений бытуют еще некоторые устаревшие методы и приемы, приводящие к неправильным оценкам и даже досадным недоразумениям. Важным условием эффективности лабораторной диагностики является сочетанное определение качественных и количественных критериев содержания патогенных стафилококков в исследуемом материале. Исходя из этого, я считаю необходимым изложить ряд методов основных микробиологических исследований, наиболее простых и доступных для каждой практической и научной лаборатории, которыми мы пользуемся в течение многих лет. ОСНОВНЫЕ ПРИНЦИПЫ ОБНАРУЖЕНИЯ И ИДЕНТИФИКАЦИИ ПАТОГЕННЫХ СТАФИЛОКОККОВ Предварительная диагностика стафилококков может основываться на бактериоскопическом изучении препаратов - мазков, окрашенных по Граму.
Патогенные стафилококки, помимо гроздевидного расположения, характеризуются правильной сферической формой клеток. Обнаружение стафилококков, находящихся внутри клеток, позволяет дать ответ о наличии стафилококковой инфекции. В большинстве же случаев для точного установления патогенности обнаруженных стафилококков требуется выделить эти микроорганизмы в чистой культуре путем посева исследуемого материала на плотные питательные среды. В настоящее время ассортимент дифференциальных, элективных и накопительных сред, предложенных для выделения патогенных стафилококков, весьма значителен и продолжает расширяться. Многие исследователи на основе знания основных биохимических характеристик и питательных потребностей патогенных стафилококков при конструировании сред стремятся повысить их высеваемость и обеспечить возможность осуществлять их количественный учет, получить надежный способ отличать потенциально болезнетворные стафилококки от сапрофитов. Употребление жидких накопительных сред для перви гемолитическую активность стафилококков. При этом необходимо помнить, что гемолитическая способность, определяемая на чашках с кровяным агаром, зависит от многих факторов - вида крови, ее концентрации, наличия в ней антитоксинов, толщины слоя среды, содержания углекислого газа в атмосфере культивирования, густоты посева, присутствия и характера сопутствующей флоры и т. д. При отборе колоний с кровяного агара необходимо отвивать как гемолитические, так и не дающие гемолиза, особенно если исследование проводится на среде с человеческой или лошадиной кровью, а отсутствие гемолиза на таких средах не позволяет заключить об отсутствии вообще гемолитической активности. Поэтому использование кровяного агара для первичного посева целесообразно только при обследовании объектов, не содержащих посторонней микрофлоры, и желательно добавлять в питательную среду кровь кролика или барана. Если же проводится исследование гноя открытых ран или отделяемого язв или свищей, то следует пользоваться элективно-дифференциальной средой для стафилококков - желточно-солевым агаром (ЖСА) Г. Н. Чистовича. Элективность этой среды обеспечивается высоким содержанием хлористого натрия, а добавленный яичный желток позволяет выявлять лецитовителлазную активность, которая является одним из показателей патогенности стафилококков и в силу этого ЖСА более четко дифференцирует патогенных представителей, чем кровяной агар. Приготовление ЖСА несложно. Заготовляют впрок и стерилизуют в автоклаве при 120 °С" в течение 20 мин питательный агар (МПА или Хоттингера) рН 7,2-7,4, содержащий 10% поваренной соли. Перед употреблением солевой питательный агар растапливают, остужают до 45-50 °С и добавляют к нему 20% по объему стерильной желточной взвеси (1 желток куриного яйца на 200 мл физиологического раствора). Для лучшего эмульсирования желательно иметь колбы со стеклянными бусами. После тщательного перемешивания среду разливают по 20-25 мл в чашки, которые могут храниться в холодильнике в течение нескольких дней. Следует производить массивный посев исследуемого материала на чашки с ЖСА, а инкубацию вести в течение 2 суток при 35-37° С.
Посторонняя флора резко подавляется, стафилококки же на ЖСА вырастают практически в чистой культуре. Непосредственно при просмотре чашек вокруг колоний отмечается образование радужных венчиков и мутной зоны - лецитовителлазная реакция. Такие колонии, не менее двух из каждого посева, отвивают на скошенный мясо-пептонный агар для последующей проверки выросших культур в реакции плазмо-коагуляции. Чтобы избежать ошибок в определении желточной реакции, необходимо иметь в виду, что иногда наблюдается помутнение среды без радужного ободка, в этом случае проба на лецитовителлазу считается отрицательной. Если же колонии, выросшие на ЖСА, не дают лецитовителлазной реакции, т. е. не окружены радужным венчиком, но имеется рост стафилококков, то их тоже считают подозрительными и также отвивают не менее двух из каждого такого посева на чашки с простым питательным агаром пятнами диаметром 5-10 мм. После суточного инкубирования при 37° С полученные макроколонии проверяют в реакции плазмоагглютинации, для чего микробную массу размешивают петлей на стекле в каплях цитратной кроличьей или человеческой плазмы, разведенной 1 :4. Образование хлопьев учитывают в течение 30с-1 мин. При наличии плазмоагглютинации такие штаммы считают подозрительными и отвивают на скошенный агар для дальнейшего изучения в коагулазной реакции. При таком отборе число пропускаемых штаммов патогенных стафилококков человеческого происхождения невелико, культуры же, выделенные от животных, требуется проверять в реакции плазмокоагуляции. Коагулазная проба является основным признаком, определяющим болезнетворность стафилококков, поэтому ее постановка требует к себе максимального внимания. Для выявления коагулазной активности у стафилококков, выделенных от людей, можно пользоваться как цельной кровью, так и плазмой кроликов или человека. Можно использовать также кровь или плазму, взя результатов проводится обязательно дважды: через 2-3 ч и 24 ч. Учитывают свертывание плазмы и образование сгустков. Обычно культуры, активно продуцирующие коагулазу, дают положительную реакцию уже через 2-3 ч. а если они обладают и выраженной фибринолитической активностью, то первоначально образовавшиеся сгустки могут подвергнуться расплавлению к концу суток. Слабокоагулирующие штаммы могут давать положительную реакцию в поздние сроки-к концу суток. Опыты, давшие сомнительный результат, необходимо повторить. Некоторые исследователи, получив отрицательный или сомнительный результат, оставляют пробирки на столе. Этого делать нельзя, так как свертывание плазмы в более поздние сроки может носить не специфический характер и его не следует принимать во внимание. Стафилококки, дающие положительную коагулазную пробу, должны рассматриваться как потенциально патогенные, независимо от наличия или отсутствия у них гемолитических свойств и характера пигмента, их относят к виду S . aureus и в дальнейшем подвергают фаготипизации и проверке на чувствительность к антибиотикам. Углубленное изучение стафилококков показало, что основной признак па-тогенности - коагулазная реакция может подвергаться изменчивости при воздействии различных факторов (Г.
Показания к госпитализации могут определяться врачом индивидуально при следующих инфекциях: ангина, ветряная оспа, грипп (ОРЗ), дизентерия, гельминтозы, коклюш, корь, краснуха, инфекционный мононуклеоз, криптоспоридиоз, орнитоз, паротит эпидемический, пневмония, рожа, сальмонеллез, скарлатина, стафилококковая инфекция, пищевые токсикоинфекции, токсоплазмоз, эризипелоид, эшерихиоз. Особое внимание обращается на карантинные заболевания и, так называемые особоопасные инфекции: чума, холера, желтая лихорадка, натуральная оспа, при которых госпитализация строго обязательна. В 1990 г Всемирная Организация Здравоохранения приняла "Хартию прав детей, находящихся на лечении в больнице". В первом параграфе "Хартии..." сказано, что госпитализация детей оправдана только в том случае, если дома (амбулаторно) им не может быть оказана адекватная (необходимая) помощь. При лечении инфекционных больных в домашних условиях медицинские работники берут на себя ответственность за организацию динамического наблюдения и полноценной терапии с обязательным выполнением контрольных исследований
1. Лабораторная диагностика инфекций, передаваемых половым путём
2. Лабораторная диагностика венерических болезней
3. Лабораторная диагностика гельминтозов
4. Лабораторная диагностика токсоплазмоза
5. Спермограмма как метод лабораторной диагностики
9. Диагностика, лечение и профилактика урогенитальных инфекций
10. Экспресс диагностика особо опасных инфекций
11. Диагностика и лечение бактериальных инфекций кожи
13. Методы микробиологической диагностики
14. Лабораторная, инструментальная и аппаратная диагностика рака поджелудочной железы
15. Микробиологическая диагностика, рентгенодиагностика и лечение бруцеллеза. Бруцеллез и беременность
16. Туберкулез: микробиологическая диагностика
17. Диагностика и профилактика неуставных взаимоотношений в части и подразделении
18. Музыкальные способности. Проблемы диагностики и развития
19. Магнитно-резонансная томография в диагностике опухолей головного мозга
20. Синдром раздраженного кишечника: этиология, патогенез, клиника, диагностика, принципы лечения
25. ВИЧ-инфекция
26. Микробиологии: медленные инфекции
27. Карл Леонгард: методы диагностики личности
28. Хламидиоз. Методы определения/диагностики
29. Частная инфекционная иммунология. Особенности иммунитета при бактериальных и вирусных инфекциях
30. Неотложная помощь при тяжелых инфекциях
31. Синдром "Дисфагия". Принципы диагностики и лечения. Организация сестринского процесса
32. Всеобъемлющая шпаргалка по инфекции
34. Диагностика и лечение сифилиса
35. Пищевые инфекции
37. ВИЧ-инфекция
41. Психологическая диагностика готовности к обучению как необходимое условие при записи ребенка в школу
42. Диагностика межличностных отношений Тимоти Лири
43. Диагностика отказов элементов и устройств автоматического управления
46. Диагностика конкурентной среды в системе маркетинга
47. Лекарственные средства для терапии кишечных инфекций
48. Программа ведения беременных при инфекциях мочевыводящих путей
49. Хронические гастриты у детей: принципы диагностики
51. Лямблиоз у детей: проблема диагностики и выбора терапии
53. Азитромицин в лечении инфекций нижних дыхательных путей. Позиции сохраняются
57. Система интерферона при ВИЧ-инфекции
58. Возбудители бактериальных инфекций человека
59. ВИЧ-инфекция - риск для стоматологов
60. Диагностика заболеваний молочных желез
61. Цитомегаловирусная инфекция
62. Менингококк и менингококковая инфекция
64. Пренатальная (дородовая) диагностика
65. Дисвагинозы при урогенитальной уреамикоплазменной инфекции у женщин репродуктивного возраста
66. О современных проблемах эпидемиологии инфекций, передаваемых половым путем
67. Cахарный диабет, диагностика и лечение
73. Современные принципы диагностики и лечения эндометриоза
76. Диагностика внутренних болезней
77. Диагностика и лечение малярии
78. Диагностика опухолей спинного мозга
79. Дифференциальная диагностика анемий
80. Дифференциальная диагностика острого аппендицита и гинекологической патологии
81. Интраскопия (Лазерные методы диагностики и термографии)
83. История болезни - Педиатрия (инфекция мочевыводящих путей)
84. Литература - Гинекология (Нарушение менструальной функции. Диагностика
85. Литература - Инфекционные болезни (менингококковая инфекция)
89. Литература - Хирургия (Анаэробная инфекция в хирургии)
91. Методология диагностики торакальных больных
92. Перикардиты, клиника, диагностика, лечение.
94. Сердечно сосудистая система, нетрадиционные методы лечения по Лазареву, диагностика
95. Современные взгляды на этиологию, патогенез и диагностику гепатитов
96. Стандарты (протоколы) диагностики и лечения болезней органов пищеварения
97. ЭКГ в диагностике инфаркта миокарда
98. Хирургия (гнойная инфекция ран)
99. Диагностика и лечение диареи при синдроме раздраженного кишечника
100. Современные тенденции эпидемического процесса трансмиссивных природноочаговых инфекций