![]() |
|
сделать стартовой | добавить в избранное |
![]() |
Диагностика стафилококковых инфекций |
Владивостокский Государственный Медицинский Университет Кафедра микробиологии, вирусологии и иммунологии РЕФЕРАТ Диагностика стафилококковых инфекций Выполнил: Новак А.Л. 301 гр., л/ф Владивосток, 1998. Предисловие Несмотря на то, что стафилококки принадлежат к числу наиболее легко обнаруживаемых и распознаваемых микроорганизмов, не требующих сложных диагностических приемов для их выявления, в практической работе микробиологи до сих пор испытывают определенные трудности при установлении их причинной роли в ряде различных заболеваний. С одной стороны, присутствие патогенных стафилококков, обнаруживаемое в исследуемом материале, не всегда является убедительным доказательством их этиологического значения. С другой, учитывая большое разнообразие проявлений биологической активности этих микробов, зависящее от разных, не всегда поддающихся учету факторов, широкую их изменчивость под влиянием лекарственных веществ и самого макроорганизма, довольно сложно бывает определить их потенциальную патогенность. Наконец, третья причина связана с тем, что стафилококки являются представителями нормальной микрофлоры из группы условно патогенных микроорганизмов и, наряду с непатогенными, патогенные представители обитают в организме людей, распространяясь при этом весьма неравномерно на разные участки человеческого тела. Если выделение патогенного стафилококка, из крови больных людей и различных полостей, которые принято считать стерильными, в подавляющем большинстве случаев может служить доказательством его роли как возбудителя болезни, то присутствие стафилококков на слизистых зева, носа и т. д. даже при явном болезненном состоянии их требует большой осторожности исследователя в выводах об этиологии данных заболеваний. Поэтому, естественно, не может быть общих рекомендаций, как при диагностике различных стафилококковых инфекций, так и при микробиологических исследованиях участков тела человека и разных объектов внешней среды. Широкий обмен мнениями между микробиологами научных учреждений и практических лабораторий, осуществляемый на съездах и конференциях, посвященных проблемам стафилококковых инфекций, а также при личных контактах, казалось бы, должен был привести к определенным взглядам на различные методы исследования, предлагаемые для выделения и идентификации стафилококков. Однако большое число запросов, поступающих из лабораторий СЭС и лечебных учреждений, свидетельствует о явных затруднениях, которые возникают у исследователей при решении разных вопросов микробиологической диагностики стафилококков, а в ряде микробиологических учреждений бытуют еще некоторые устаревшие методы и приемы, приводящие к неправильным оценкам и даже досадным недоразумениям. Важным условием эффективности лабораторной диагностики является сочетанное определение качественных и количественных критериев содержания патогенных стафилококков в исследуемом материале. Исходя из этого, я считаю необходимым изложить ряд методов основных микробиологических исследований, наиболее простых и доступных для каждой практической и научной лаборатории, которыми мы пользуемся в течение многих лет.
ОСНОВНЫЕ ПРИНЦИПЫ ОБНАРУЖЕНИЯ И ИДЕНТИФИКАЦИИ ПАТОГЕННЫХ СТАФИЛОКОККОВ Предварительная диагностика стафилококков может основываться на бактериоскопическом изучении препаратов — мазков, окрашенных по Граму. Патогенные стафилококки, помимо гроздевидного расположения, характеризуются правильной сферической формой клеток. Обнаружение стафилококков, находящихся внутри клеток, позволяет дать ответ о наличии стафилококковой инфекции. В большинстве же случаев для точного установления патогенности обнаруженных стафилококков требуется выделить эти микроорганизмы в чистой культуре путем посева исследуемого материала на плотные питательные среды. В настоящее время ассортимент дифференциальных, элективных и накопительных сред, предложенных для выделения патогенных стафилококков, весьма значителен и продолжает расширяться. Многие исследователи на основе знания основных биохимических характеристик и питательных потребностей патогенных стафилококков при конструировании сред стремятся повысить их высеваемость и обеспечить возможность осуществлять их количественный учет, получить надежный способ отличать потенциально болезнетворные стафилококки от сапрофитов. Употребление жидких накопительных сред для первичного выделения стафилококков нецелесообразно, так как лишает исследователя возможности количественной оценки содержания микробов в обследуемых объектах, а при случайных загрязнениях способствует ошибкам. Особенно это относится к таким исследованиям, как обнаружение носительства патогенных стафилококков, где доказательством является лишь массивный рост, либо определение этиологической роли этих микроорганизмов "при пищевых отравлениях или наружных воспалительных процессах. Если же речь идет об исследовании крови, а также о тех немногих случаях, когда бывает необходимо выявить даже единичные жизнеспособные особи этих микробов, например при контроле эффективности дезинфекции, проверке на стерильность или титрационных посевах, то в подобных случаях использование накопительных сред вполне оправдано. Из большого числа разнообразных питательных сред, опробованных для первичного выделения стафилококков, в практике оправдал,;1' себя немногие. Обычный питательный агар (рН 7,2 7,4), приготовленный путем добавления 2% агар-агара к мясопептонному бульону или к триптическому перевару Хоттингера, может быть использован при исследовании экссудатов из закрытых полостей. Стафилококки вырастают через 18—24 ч инкубации при 37° С в виде гладких блестящих с ровными краями непрозрачных и слегка выпуклых колоний. Характер пигмента выявляется лучше после дополнительного суточного выдерживания чашек при комнатной температуре (20° С) на свету. Если в исследуемом материале присутствует посторонняя флора, то по внешнему виду колонии стафилококков могут быть трудно отличимы. Употребление кровяного агара дает возможность, кроме выявления пигмента, определить и гемолитическую активность стафилококков. При этом необходимо помнить, что гемолитическая способность, определяемая на чашках с кровяным агаром, зависит от многих факторов — вида крови, ее концентрации, наличия в ней антитоксинов, толщины слоя среды, содержания углекислого газа в атмосфере культивирования, густоты посева, присутствия и характера сопутствующей флоры и т.
д. При отборе колоний с кровяного агара необходимо отвивать как гемолитические, так и не дающие гемолиза, особенно если исследование проводится на среде с человеческой или лошадиной кровью, а отсутствие гемолиза на таких средах не позволяет заключить об отсутствии вообще гемолитической активности. Поэтому использование кровяного агара для первичного посева целесообразно только при обследовании объектов, не содержащих посторонней микрофлоры, и желательно добавлять в питательную среду кровь кролика или барана. Если же проводится исследование гноя открытых ран или отделяемого язв или свищей, то следует пользоваться элективно-дифференциальной средой для стафилококков — желточно-солевым агаром (ЖСА) Г. Н. Чистовича. Элективность этой среды обеспечивается высоким содержанием хлористого натрия, а добавленный яичный желток позволяет выявлять лецитовителлазную активность, которая является одним из показателей патогенности стафилококков и в силу этого ЖСА более четко дифференцирует патогенных представителей, чем кровяной агар. Приготовление ЖСА несложно. Заготовляют впрок и стерилизуют в автоклаве при 120 °С" в течение 20 мин питательный агар (МПА или Хоттингера) рН 7,2—7,4, содержащий 10% поваренной соли. Перед употреблением солевой питательный агар растапливают, остужают до 45—50 °С и добавляют к нему 20% по объему стерильной желточной взвеси (1 желток куриного яйца на 200 мл физиологического раствора). Для лучшего эмульсирования желательно иметь колбы со стеклянными бусами. После тщательного перемешивания среду разливают по 20—25 мл в чашки, которые могут храниться в холодильнике в течение нескольких дней. Следует производить массивный посев исследуемого материала на чашки с ЖСА, а инкубацию вести в течение 2 суток при 35—37° С. Посторонняя флора резко подавляется, стафилококки же на ЖСА вырастают практически в чистой культуре. Непосредственно при просмотре чашек вокруг колоний отмечается образование радужных венчиков и мутной зоны — лецитовителлазная реакция. Такие колонии, не менее двух из каждого посева, отвивают на скошенный мясо- пептонный агар для последующей проверки выросших культур в реакции плазмо- коагуляции. Чтобы избежать ошибок в определении желточной реакции, необходимо иметь в виду, что иногда наблюдается помутнение среды без радужного ободка, в этом случае проба на лецитовителлазу считается отрицательной. Если же колонии, выросшие на ЖСА, не дают лецитовителлазной реакции, т. е. не окружены радужным венчиком, но имеется рост стафилококков, то их тоже считают подозрительными и также отвивают не менее двух из каждого такого посева на чашки с простым питательным агаром пятнами диаметром 5—10 мм. После суточного инкубирования при 37° С полученные макроколонии проверяют в реакции плазмоагглютинации, для чего микробную массу размешивают петлей на стекле в каплях цитратной кроличьей или человеческой плазмы, разведенной 1 :4. Образование хлопьев учитывают в течение 30с—1 мин. При наличии плазмоагглютинации такие штаммы считают подозрительными и отвивают на скошенный агар для дальнейшего изучения в коагулазной реакции.
Показания к госпитализации могут определяться врачом индивидуально при следующих инфекциях: ангина, ветряная оспа, грипп (ОРЗ), дизентерия, гельминтозы, коклюш, корь, краснуха, инфекционный мононуклеоз, криптоспоридиоз, орнитоз, паротит эпидемический, пневмония, рожа, сальмонеллез, скарлатина, стафилококковая инфекция, пищевые токсикоинфекции, токсоплазмоз, эризипелоид, эшерихиоз. Особое внимание обращается на карантинные заболевания и, так называемые особоопасные инфекции: чума, холера, желтая лихорадка, натуральная оспа, при которых госпитализация строго обязательна. В 1990 г Всемирная Организация Здравоохранения приняла "Хартию прав детей, находящихся на лечении в больнице". В первом параграфе "Хартии..." сказано, что госпитализация детей оправдана только в том случае, если дома (амбулаторно) им не может быть оказана адекватная (необходимая) помощь. При лечении инфекционных больных в домашних условиях медицинские работники берут на себя ответственность за организацию динамического наблюдения и полноценной терапии с обязательным выполнением контрольных исследований
1. Диагностика стафилококковых инфекций
2. Современные подходы к диагностике папилломавирусной инфекции гениталий у женщин
3. Экспресс диагностика особо опасных инфекций
4. Новый, высокоточный метод диагностики инфекций мочеполовой системы
5. Экспресс диагностика особо опасных инфекций
9. Магнитно-резонансная томография в диагностике опухолей головного мозга
10. Синдром раздраженного кишечника: этиология, патогенез, клиника, диагностика, принципы лечения
12. Эшерихии, как этиологические агенты внутрибольничных инфекций
13. Клиника Диагностика и Лечение Гиперпластических процессов эндометрии
14. Диагностика с помощью ядерного магнитного резонанса
15. Лучевая диагностика. Магнитно-ядерный резонанс при исследовании спинного мозга
16. Синдром длительного сдавления: клиника, диагностика, лечение на этапах эвакуации
17. Диагностика заболеваний сердца и сосудов
18. Ультразвуковая диагностика воспалительных заболеваний придатков матки
20. Научно-практический подход к вопросам клиники и диагностики и хирургического лечения ЧМТ
21. Диагностика и лечение послеоперационного перитонита
25. Диагностика и лечение сифилиса
26. Сравнительная характеристика методов лабораторной диагностики трихомоноза
29. Педагогическая диагностика
30. Пищевые инфекции
31. Диагностика психологической готовности к школе
32. Клиническая психология: предмет, задачи, виды диагностики
33. Методы диагностики тревоги и тревожности младших школьников
34. Приёмы преодоления трудностей в процессе допроса и диагностики неискренности допрашиваемого.
35. МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ ИНФЕКЦИОННЫХ БОЛЕЗНЕЙ (КЛИНИЧЕСКИЙ И ЭПИЗООТОЛОГИЧЕСКИЙ МЕТОДЫ)
37. Анализ и диагностика финансово-хозяйственной деятельности предприятия
41. Хронические гастриты у детей: принципы диагностики
43. Лямблиоз у детей: проблема диагностики и выбора терапии
45. Азитромицин в лечении инфекций нижних дыхательных путей. Позиции сохраняются
46. Профилактика респираторных инфекций
47. Реноваскулярная артериальная гипертония: диагностика и лечение
48. Диагностика и лечение синдрома «сухого глаза» у больных, получающих b-адреноблокаторы
49. Система интерферона при ВИЧ-инфекции
50. Возбудители бактериальных инфекций человека
51. ВИЧ-инфекция - риск для стоматологов
52. Диагностика заболеваний молочных желез
53. Цитомегаловирусная инфекция
57. Дисвагинозы при урогенитальной уреамикоплазменной инфекции у женщин репродуктивного возраста
58. О современных проблемах эпидемиологии инфекций, передаваемых половым путем
59. Cахарный диабет, диагностика и лечение
63. Понятие о внутрибольничной инфекции
64. Цитомегаловирусная инфекция и беременность
65. Современные принципы диагностики и лечения эндометриоза
68. Аттестационная работа по функциональной диагностике
69. Диагностика заболеваний парадонта
73. Значение серологических реакций при диагностике сифилиса
74. Инфекции
75. История болезни - Детские болезни (инфекция мочевыводящих путей)
76. Литература - Акушерство (основные проблемы пренатальной диагностики)
77. Литература - Другое (клиника, диагностика, лечение некоторых форм)
78. Литература - Микробиология (ВИЧ-ИНФЕКЦИЯ)
79. Литература - Педиатрия (дифференциальная диагностика желтух и детей)
80. Литература - Терапия (Дифференциальная диагностика выпота в плевральную
81. Литература - Травматология (Раневая инфекция)
82. Лучевая диагностика неотложных состояний в пульмонологии
83. Методология диагностики пороков сердца
84. Методы диагностики и лечения рожистого воспаления
85. Проявления специфических инфекций (туберкулез, сифилис) в полости рта
89. Терапия (инфекция helicobacter pylori)
90. Ультразвуковая диагностика
91. Рак простаты: вопросы диагностики и стадирования
92. Диагностика и лечение увеитов герпесвирусной и хламидийной этиологии
93. Урогенитальная хламидийная инфекция
94. NT-proBNP - Диагностика и мониторинг сердечной недостаточности
95. Лекции - Педиатрия (НР-инфекция у детей)
96. Взгляд на проблему ВИЧ-инфекции(СПИДа), история и перспективы
97. Лекции - Терапия (Дифференциальная диагностика желтухи)
98. Гинекология (клиника, диагностика, лечение гиперпластич. процессов)
99. Современные методы ультразвуковой диагностики рака предстательной железы
100. История болезни - Детские болезни (инфекция мочевыводящих путей)