Библиотека Рефераты Курсовые Дипломы Поиск
Библиотека Рефераты Курсовые Дипломы Поиск
сделать стартовой добавить в избранное
Кефирный гриб на сайте www.za4et.net.ru

Биология Биология

Использование метода люминесцентной микроскопии в исследовании микроводорослей

Фонарь садовый «Тюльпан».
Дачные фонари на солнечных батареях были сделаны с использованием технологии аккумулирования солнечной энергии. Уличные светильники для
106 руб
Раздел: Уличное освещение
Пакеты с замком "Extra зиплок" (гриппер), комплект 100 штук (150x200 мм).
Быстрозакрывающиеся пакеты с замком "зиплок" предназначены для упаковки мелких предметов, фотографий, медицинских препаратов и
148 руб
Раздел: Гермоупаковка
Совок №5.
Длина совка: 22 см. Цвет в ассортименте, без возможности выбора.
18 руб
Раздел: Совки

МИНИСТЕРСТВО НАУКИ И ОБРАЗОВАНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ ФЕДЕРАЛЬНОЕ АГЕНТСТВО ПО ОБРАЗОВАНИЮ СИБИРСКИЙ ФЕДЕРАЛЬНЫЙ УНИВЕРСИТЕТ ИНСТИТУТ ФУНДАМЕНТАЛЬНОЙ БИОЛОГИИ И БИОТЕХНОЛОГИИ КАФЕДРА ФИЗИОЛОГИИ РАСТЕНИЙ И БИОТЕХНОЛОГИИ Курсовая работа ИСПОЛЬЗОВАНИЕ МЕТОДА ЛЮМИНЕСЦЕНТНОЙ МИКРОСКОПИИ В ИССЛЕДОВАНИИ МИКРОВОДОРОСЛЕЙ студентка III курса Н.А. Толстоноженко Красноярск 2008 СОДЕРЖАНИЕ Введение Глава 1. Обзор литературы Явление флуоресценции Развитие флуоресцентной микроскопии Флуорохромы и флуорохромирование Глава 2. Объекты и методы исследования 2.1 Объекты флуоресцентной микроскопии 2.2 Возможности флуоресцентной микроскопии Глава 3. Использование метода люминесцентной микроскопии в исследовании микроводорослей 3.1 Выявление физиологического состояния клеток микроводорослей 3.2 Количественная регистрация интенсивности флуоресценции 3.3 Оценка степени токсичности отдельных веществ для водорослей 3.4 Определение содержания витаминов в растительных клетках Заключение Список литературы Summary ВВЕДЕНИЕ Функционирование и роль микроводорослей в различных экосистемах определяется широкими адаптационными способностями, которые включают изменение структурных и физиологических свойств фотосинтетического аппарата. Изучение модельных систем естественного фитопланктона позволяет решить ряд теоретических проблем в области исследований фотосинтеза, а также имеет практическое значение для прогнозирования развития водорослей при возрастающей антропогенной нагрузке. Флуоресцентные характеристики фитопланктона используются для оперативного определения концентрации хлорофилла, на основе которой рассчитывается биомасса и продуктивность водорослей. Измерение концентрации хлорофилла позволяет получить сведения о фотосинтетической активности микроводорослей. В настоящее время метод флуоресцентного анализа выступает в качестве методической основы решения двух крупных проблем: интеграция биологических (растительных) систем и организация мониторинга. Преимущество люминесцентной микроскопии, как одного из флуоресцентных методов исследования, заключается в том, что информацию о состоянии фотосинтетического аппарата и отдельных клеток можно получить за очень короткий срок при относительно малом объёме проб. Целью работы является изучение метода люминесцентной микроскопии для исследования состояния микроводорослей. В задачи работы входило: 1. Ознакомиться с особенностями люминесцентной микроскопии, местом её среди флуоресцентных методов исследования. 2. Изучить методику выявления физиологического состояния и оценки степени токсичности отдельных веществ для клеток микроводорослей с помощью люминесцентной микроскопии. 3. Изучить методику определения содержания нефлуоресцирующих веществ – витаминов – в растительных клетках с помощью исследуемого метода. 4. Изучить методику количественной регистрации интенсивности флуоресценции методом люминесцентного микроскопирования. ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 1.1 Явление флуоресценции При взаимодействии света с веществом может происходить преломление световых лучей и их рассеяние, либо поглощение фотонов молекулами, или то и другое вместе.

Если произошло поглощение кванта света, то через 10-9с может происходить испускание части поглощённой энергии в виде кванта света с большей длиной волны: такое излучение называется люминесценцией. Встречающиеся в природе явления люминесценции весьма разнообразны. Различают два вида люминесценции, отличающихся по времени жизни и энергии излучаемых фотонов. Исходя из наиболее характерного качественного признака люминесценции – степени её длительности – различают флуоресценцию – свечение мгновенное, появляющееся лишь в момент возбуждения светящегося объекта, и фосфоресценцию – свечение более длительное, продолжающееся иногда весьма долго по окончании возбуждения. Изучение люминесценции позволяет судить о строении поглощающих свет молекул и участков молекул (хромофоров), а также производить их качественный и количественный анализ, выяснять физико-химические свойства среды, окружающей молекулы или их хромофорные группы. Различают собственную (первичную) люминесценцию, наблюдаемую без окрашивания, и вторичную (наведённую), которая возникает после обработки химическим агентом или красителем. Согласно закону Стокса, спектр флуоресценции лежит в более длинноволновой области по сравнению со спектром поглощения того же соединения. Это означает, что средняя энергия квантов флуоресценции меньше средней энергии поглощённых квантов. Правило Каши относится к форме спектра флуоресценции при возбуждении объекта светом разных длин волн. Испускание квантов флуоресценции всегда происходит с нижнего возбуждённого уровня молекул, независимо от того, на каком уровне оказался электрон в результате поглощения. Т.е. какой бы длиной волны не была возбуждена молекула, излучение будет происходить из одного и того же состояния молекулы. Интенсивность флуоресценции (Iф) зависит от концентрации флуоресцирующих молекул (Z), интенсивности возбуждающего света (Iв), значение молярного коэффициента поглощения (Еλ) и величины квантового выхода флуоресценции (Кλ): Iф=2,3 Iв Еλ Кλ Z L, где L – длина оптического пути в объекте. Измеряемая интенсивность флуоресценции даёт информацию о величине Кλ Z, т.е. о количестве флуоресцирующих молекул и их способности флуоресцировать (квантовый выход). Это уравнение справедливо при поглощении объектом менее 5% возбуждающего света, что обычно имеет место в физиологических опытах. При поглощении более 5% света наблюдается нелинейная зависимость. Для характеристики флуоресценции помимо её интенсивности и квантового выхода, можно использовать значения смещения максимума флуоресценции по спектру, время жизни флуоресценции молекулы и степень поляризации флуоресценции. Перечисленные параметры позволяют получить информацию о характере взаимодействия флуоресцентных молекул между собой и с окружающей их средой. 1.2 Развитие флуоресцентной микроскопии Люминесцентная микроскопия – метод микроскопии, позволяющий наблюдать первичную или вторичную люминесценцию микроорганизмов, клеток, тканей или отдельных структур, входящих в их состав. Цвет люминесценции, т.е. длина волны излучаемого света зависит от химической структуры и от физико–химического состояния микроскопируемого объекта, что и обуславливает возможность использование люминесцентной микроскопии в целях микробиологической и цитологической диагностики, для дифференцирования отдельных компонентов клеток.

Первичная люминесценция присуща ряду биологически активных веществ, таких, как ароматические аминокислоты, порфирины, хлорофилл, витамины А, В2, В1, некоторые антибиотики (тетрациклин) и химиотерапевтические вещества (акрихин, риванол). Вторичная, или наведённая, люминесценция возникает в результате обработки микроскопируемых объектов флюоресцирующими красителями – флюорохромами, что позволяет проводить люминесцентно–цитологический и люминесцентно–цитохимический анализ. В истории развития люминесцентной микроскопии выделяют несколько этапов, связанных с усовершенствованием методики. Люминесцентная микроскопия появилась в начале прошлого века как разновидность ультрафиолетовой микроскопии. В 1910 году А. Кёллер доказал принципиальную возможность создания люминесцентного микроскопа. В 1911 г. изобретён люминесцентный микроскоп, который был использован русским ботаником М.С. Цветом для изучения люминесценции хлорофилла растительных клеток. Прогресс люминесцентной микроскопии в дальнейшем был связан с введением в практику флуоресцентных красителей, так называемых флуорохромов, которые были разработаны Хайтингером и его сотрудниками в 1935 году. Применение сильно разбавленных растворов флуорохромов, избирательно связывающихся с определёнными структурами клеток, и прежде всего акридинового оранжевого, было введено Штруггером в 1940 году. Происходило и усовершенствование аппаратуры (разработка метода возбуждения люминесценции падающим светом через объектив микроскопа с использованием интерференционной светоделительной пластинки), разработка новых люминесцентно-цитохимических методов, изысканием новых областей её применения, нашедших широкое применение в микробиологии, иммунологии и других областях медико–биологических исследований. В настоящее время различают несколько типов люминесцентной микроскопии в зависимости от характера освещения. При освещении объекта проходящим светом (обычный путь освещения) имеют дело со светопольной люминесцентной микроскопией. Замена светопольного конденсора конденсором тёмного поля даёт возможность осуществить люминесцентную микроскопию в тёмном поле (люминесцентная ультрамикроскопия). В случае освещения объекта сверху - имеют дело с люминесцентной микроскопией в падающем (отражённом) свете. 1.3 Флуорохромы и флуорохромирование У подавляющего большинства биологических объектов их собственная неяркая люминесценция не позволяет проводить люминесцентно-микроскопические исследования и для избирательного выявления определённых структур применяют люминесцентные красители - флуорохромы. Некоторые из этих красителей диффузно распределяются в клетках, другие избирательно связываются с определёнными структурами клеток или даже с определёнными химическими веществами. Известно несколько десятков органических соединений, с успехом используемых в качестве флуорохромов. К ним относятся красители: тиазоловые, хинолиновые, азокрасители и особенно акриловые производные. Хорошими флуорохромами являются некоторые естественные пигменты (хлорофилл, липохромы), алкалоиды (берберин, хинин), углеводороды (бензпирен, дибензаантрацен).

Сейчас простое бактериоскопическое исследование является недостаточным. Рациональными считаются бактериологический (метод посева) и биологический (заражение лабораторных животных). Чаще исследуют мокроту, а при ее отсутствии промывные воды бронхов, желудка или слизь из гортани. Бактериоскопические методы выявления БК включают обычную бактериоскопию окрашенных по ЦилюНильсену мазков или флотационного кольца, люминесцентную микроскопию. Обычная бактериоскопия обнаруживает микобактерии лишь при очень большом их количестве (не менее 50000 клеток в 1Pмл материала). Для достоверности исследование проводят многократно и различными методами. Большое значение, кроме БК, имеет обнаружение эластических волокон в мокроте, что указывает на разрушение легочной ткани. Пластические волокна могут обнаруживаться и при других заболеваниях легких, например при абсцессе, раке и др. При обострении старого туберкулезного процесса обнаруживают элементы, составляющие тетраду Эрлиха: обызвествленные эластические волокна, кристаллы холестерина, известь и БК

1. Грибы и их использование

2. БАД к пище и их использование в бодибилдинге

3. Организация и порядок использования в бою мотопехотной (пехотной, танковой) (бригады армий вероятного противника)

4. Глобальные проблемы человечества. Использование Мирового океана

5. Платежи за использование природных ресурсов

6. Банковские операции с использованием векселей
7. Авторский договор как основание правомерного использования произведения
8. Проблема нераспространения и не использования оружия массового уничтожения (ОМУ)

9. Животный мир как объект охраны и использования

10. Правовое регулирование использования и охраны животного мира

11. Способы перевода просторечия, использованного в романе А. Силлитоу "Ключ от двери", на русский язык

12. Использование видео на уроках английского языка

13. Использование символа как стилистического средства в поэзии символизма (на примере лирики немецкого поэта Стефана Георге)

14. Методическое руководство по проведению занятия по русскому языку в рамках аудиовизуального курса для студентов-иностранцев с использованием видеозаписи мультфильма "Мороз Иванович".

15. Фантастика и миф: использование мифологических образов в современной фантастической литературе

16. Использование кабинета для внеклассной работы по иностранному языку

Точилка механическая.
Точилка механическая. Большой контейнер для стружки. Не скользит по поверхности. Материал корпуса: пластик. Цвет представлен в
569 руб
Раздел: Точилки
Кружка "Кот", микс.
Керамическая кружка с ложкой и деревянной крышкой в комплекте сделана в оригинальной крафтовой манере, имитирующей ручную лепку. Бока
434 руб
Раздел: Кружки
Игра с липучками "Мама и малыш".
Потерялись малыши, где же их мамы? Собираем пары, ищем следы животных и соединяем в одну картинку на липучках. Увлекательные задания
497 руб
Раздел: Прочее

17. Использование информационных технологий в туризме

18. Использование полей и закладок для оформления и автоматизации редактирования и обработки экономической информации в документах Word

19. Использование линий электропроводки в качестве среды передачи информации

20. Анализ системы безопасности Microsoft Windows 2000 Advanced Server и стратегий ее использования

21. Использование компьютерных технологий в деятельности ОВД

22. Использование лазеров в информационных технологиях
23. Задачи графических преобразований в приложениях моделирования с использованием ЭВМ
24. Объектно-ориентированное программирование на С с использованием библиотеки OpenGL

25. Принципы проектирования и использования многомерных баз данных

26. Программа сложной структуры с использованием меню

27. Кадры с использованием программы Microsoft Access 97

28. Использование макросов в MS Access 2000

29. Создание проекта с использованием программы GeniDAQ и контроллеров серии АДАМ-4000

30. Графы. решение практических задач с использованием графов (С++)

31. Использование СУБД ACCESS 7.0

32. Использование полей и закладок для оформления и автоматизации редактирования и обработки экономической информации в документах Word

Развивающая игра "Магнитные истории. Времена года".
Игра «Магнитные истории. Времена года» - это познавательная для Вашего ребенка игра, позволяющая в игровой форме познакомиться с временами
499 руб
Раздел: Игры на магнитах
Электронная энциклопедия для малышей "Уроки Божьей Коровки".
Уроки божьей коровки – это электронная энциклопедия для малышей в формате книжки-планшетика! 120 обучающих картинок, 60 логических пар, 8
655 руб
Раздел: Викторины
Книга-сейф "Двенадцать стульев", 24x17x6 см.
Регулярно удалять пыль сухой, мягкой тканью. Материал: картон, металл. Товар не подлежит обязательной сертификации.
1322 руб
Раздел: Шкатулки сувенирные

33. Использование гиперссылок при создании Веб-страницы

34. Использование электронных таблиц в Power Poin

35. Опыт использования ЭВМ на уроках математики

36. Графы. решение практических задач с использованием графов (С++)

37. Влияние совместного использования пиридитола и дыхания гиипоксически-гиперкопнической газовой смесью на мыслительные способности здоровых пациентов

38. Использование ультрафиолета как современное бактерицидное средство.
39. Использование следов обуви в расследовании и раскрытии преступлений
40. Использование следов рук в расследовании и раскрытии преступлений

41. Использование фото и видео съемки в криминалистике

42. Использование компьютерных технологий в деятельности милиции

43. Рациональное использование водных ресурсов

44. Обеззараживание и обезвреживание с использованием окислителей природных, сточных вод и их осадклв

45. Использование солнечной энергии

46. Основы рационального использования природных ресурсов в условиях научно-технического прогресса

47. Принципы рационального использования лесов

48. Рациональное использование и охрана животных

Пакеты с замком "Zip-Lock", 30х40 см (100 штук).
Размер: 30х40 см. Толщина: 40 мкм. В упаковке: 100 штук. Материал: полиэтилен (ПВД).
324 руб
Раздел: Пакеты для продуктов
Кружка фарфоровая "FIFA 2018. Забивака. Без рук!", 400 мл.
Объем: 400 мл. Материал: фарфор.
358 руб
Раздел: Кружки, посуда
Набор "Скорая помощь".
Набор "Скорая помощь" будет прекрасным подарком для любого ребенка, отлично подойдет для сюжетно-ролевых игр. Выполнен в виде
763 руб
Раздел: Наборы доктора

49. Изучение экологического состояния территории Большеземельской тундры с использованием методов дистанционного мониторинга

50. Рациональное использование и охрана животных

51. Методика преподавания темы: "Использование электронных таблиц для финансовых и других расчетов" в 10 классе

52. Подготовка к школе. Развитие речи, логического мышления и познавательных способностей дошкольников с элементами обучения грамоте и использованием математического материала

53. Использование проблемных ситуаций на уроках математики в развитии творческого мышления младших школьников

54. Методика преподавания темы “Электромагнитные колебания” в средней школе с использованием компьютерных технологий
55. Использование библейских сюжетов в проектной деятельности учащихся старших классов средней школы (на примере немецкого языка)
56. Психолого-педагогические проблемы использования компьютерных игр, программ с игровой компонентой в образовании

57. Использование различных методов обучения с целью активизации познавательной деятельности на уроках технологии

58. Использование компьютера в учебно-воспитательном процессе

59. Использование видео на уроках английского языка

60. Грибы и их использование

61. Использование сети Интернет в политике

62. Использование чёрной и цветной металлургии, их процессы и характеристики

63. Ветроэнергетика. Перспективы использования в Республике Беларусь

64. Возможности радиолокационного тренажера NMS-90 и его использование для решения задач расхождения судов в условиях ограниченной видимости

12 цветных фломастеров для малышей.
Для маленьких любителей рисования представлен набор для развития творческих навыков. Фломастеры, которые подымут настроение и сделают
568 руб
Раздел: 7-12 цветов
Набор "Кухня Laura" с варочной панелью, со звуковыми эффектами (в пакете).
Набор состоит из одного модуля. Этот игровой комплекс идеально подходит для сюжетно-ролевых игр девочек старше 3-х лет. В наборе есть все
1854 руб
Раздел: Кухни
Подушка "Нордтекс. Лондон", 40х40 см.
Декоративные подушки являются непременным элементом современного интерьера. Они могут послужить прекрасным украшением не только спальни,
454 руб
Раздел: Подушки

65. Использование роботов в промышленных предприятиях

66. Порядок использования водных объектов для плавания на маломерных плавательных средствах и эксплуатации баз (сооружений) для их стоянок в пределах административных границ Мурманской области в прибрежной полосе Баренцева и Белого морей

67. Исследование возможности использования эффекта автодинного детектирования в генераторах на диоде Ганна для контроля параметров вибрации

68. Предварительный усилитель с использованием ОУ

69. Учебно-лабораторный комплекс по удаленному администрированию цифровых телефонных станций с использованием локально-вычислительной сети

70. Экономическая эффективность использования земельных угодий в ОГУСП «Пригородный»
71. Использование социальной психологии в PR деятельности
72. Исследование и использование эффеката Кирлиан

73. Производство, передача и использование электроэнергии

74. Изучение поверхности полупроводника с помощью сканирующего электронного микроскопа

75. Инфра и ультра звуки и их использование

76. Использование микробов в хозяйственной деятельности

77. Организационная основа использования физической культуры на детском курорте и общем курорте

78. Эффективность использования нестандартных спортивных сооружений в ВУЗах, школах

79. Эффективность использования финансовых векселей в расчетных операциях

80. Учет, контроль использования материалов на производстве

Сменный фильтр "Аквафор В-100-5", 3 штуки.
Модуль В100-5 содержит в оптимальном соотношении гранулы кокосового угля, ионообменные смолы и "ноу-хау" АКВАФОР - волокна
576 руб
Раздел: Фильтры для воды
Беговел "Funny Wheels Rider Sport" (цвет: розовый).
Беговел - это современный аналог детского велосипеда без педалей для самых маленьких любителей спорта. Удобный и простой в
2900 руб
Раздел: Беговелы
Молокоотсос ручной "Avent" с контейнерами для хранения молока.
Ручной молокоотсос Avent с контейнерами для хранения молока - это необходимая вещь для молодых мам, которые испытывают сложности со
2872 руб
Раздел: Молокоотсосы, аксессуары

81. Экономическая оценка использования новых информационных технологий в бухгалтерском учете

82. Использование функционально-стоимостного анализа при создании стоимости нового товара

83. Товарный знак и его использование в целях рекламы

84. Использование средств маркетинга в антикризисном управлении

85. Использование менеджером своего персонала в процессе маркетинга и продаж

86. Возможности использования в российских условиях зарубежного опыта управления предприятием, организацией, фирмой
87. Использование компьютеров в управлении предприятием
88. Трудовые ресурсы и пути улучшения их использования

89. Использование компьютерных программ для анализа финансового состояния организации

90. Анализ проблем использования математических моделей для снижения уровня неопределенности принятия УР

91. Создание фермерского хозяйства или использование ресурсов земли

92. Технико-экономический анализ. Анализ состава и движения рабочей силы и эффективности использования рабочего времени

93. Учет и аудит основных средств и эффективности их использования в условиях функционирования АРМ бухгалтера

94. Анализ организационно-технических и социально-экономических мероприятий по улучшению использования трудовых ресурсов и фонда заработной платы

95. Анализ эффективности использования основоного капитала на Молодечненском заводе металлоконструкций

96. Анализ состояния и использования основных фондов предприятия

Рамочка тройная "Классика" (коричневая).
Тройная рамочка с отпечатком - это особый подход к созданию очаровательного подарка на память для этого особого периода жизни, с
2890 руб
Раздел: Мультирамки
Пазл "Стройка", 30 элементов.
Пазлы Ларсен - это прежде всего обучающие пазлы. Они привлекают прежде всего филигранностью исполнения. Сделанные из высококачественного
548 руб
Раздел: Пазлы (5-53 элементов)
Ручка-стилус шариковая "Людмила".
Перед Вами готовый подарок в стильной упаковке — шариковая ручка со стилусом. Она имеет прочный металлический корпус, а надпись нанесена с
415 руб
Раздел: Металлические ручки

97. Анализ состояния и эффективности использования активов организации

98. Использование корпоративных информационных систем в управлении организацией: необходимость, проблемы, перспективы

99. Анализ использования основных средств


Поиск Рефератов на сайте za4eti.ru Вы студент, и у Вас нет времени на выполнение письменных работ (рефератов, курсовых и дипломов)? Мы сможем Вам в этом помочь. Возможно, Вам подойдет что-то из ПЕРЕЧНЯ ПРЕДМЕТОВ И ДИСЦИПЛИН, ПО КОТОРЫМ ВЫПОЛНЯЮТСЯ РЕФЕРАТЫ, КУРСОВЫЕ И ДИПЛОМНЫЕ РАБОТЫ. 
Вы можете поискать нужную Вам работу в КОЛЛЕКЦИИ ГОТОВЫХ РЕФЕРАТОВ, КУРСОВЫХ И ДИПЛОМНЫХ РАБОТ, выполненных преподавателями московских ВУЗов за период более чем 10-летней работы. Эти работы Вы можете бесплатно СКАЧАТЬ.