![]() |
|
сделать стартовой | добавить в избранное |
![]() |
Культуры изолированных клеток и тканей как новый источник для получения лекарственного сырья |
Федеральное агентство по образованию Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования Петрозаводский государственный университет Медицинский факультетКурсовая работа по фармакогнозии «Культуры изолированных клеток и тканей как новый источник для получения лекарственного сырья».Панкрашкина Полина 3 курс 320 группа Руководитель: К.б.н., ст. преподаватель Морозова К.В.Петрозаводск 2007г. СодержаниеВведение 1. История создания культуры клеток и тканей 2. Культивирование растительных клеток и тканей 2.1 Понятие культуры клеток и тканей 2.2 Синтез вторичных метаболитов 2.3 Влияние генетических, физических и химических факторов на рост и развитие культур и синтез вторичных метаболитов 3. Культура ткани растений и синтез вторичных метаболитов 3.1 Образование полифенолов в культуре ткани чайного растения 3.2 Образование b-карболиновых алкалоидов в культуре ткани гармалы обыкновенной 3.3 Накопление алкалоидов в культуре ткани раувольфии змеиной 3.4 Алкалоиды каллусных клеток Мака прицветного 3.5 Образование вторичных метаболитов в культуре ткани рода Ru aceae Заключение Литература ВведениеРастения являются незаменимым источником получения очень многих практически важных веществ. При этом следует подчеркнуть, что промышленное получение некоторых соединений, например, сердечных гликозидов, флавоноидов, кумаринов, эфирных масел достигается только путем выделения их из растительного сырья. Между тем возможности получения так называемых &quo ; метаболитов интереса&quo ; в достаточном количестве зачастую ограничены. Это связано с сокращением ресурсов некоторых ценных дикорастущих растений, принадлежностью многих лекарственных растений к группам эндемов, редким и исчезающим видам. В связи с этим большой интерес в качестве источника биологически активных веществ представляют культуры растительных клеток. Цель моего исследования – привлечь внимание к актуальности этой темы, как примеру слияния высоких технологий, науки и экономически выгодного способа получения лекарственного сырья. Сбор дикорастущего сырья наносит вред экологической обстановке региона и всей планете в целом, а при неправильном сборе может и вовсе привести к вырождения зарослей. Культивировать целое растение также не практично если в качестве сырья используется, к примеру, только его корневища или корни. Это значит, что вся надземная часть в лучшем случае идёт на корм животным или просто выбрасывается. Культивирование изолированных клеток и тканей даёт возможность получать именно то сырьё которое необходимо, а кроме того позволяет увеличить количество и качество самих биологически активных веществ. 1. История создания культур клеток и тканейИстория развития метода культуры тканей начинается на рубеже XIX-XX вв. с опытов немецких ученых Фехтинга, Рехингера и Хаберландта, которые пытались выращивать на растворах сахарозы изолированные из растений кусочки тканей, группы клеток, волоски. Не достигнув экспериментальных успехов, эти исследователи, однако, высказали ряд важных идей и гипотез, которые были подтверждены значительно позже. В 1947 г.
Телл и Готре впервые показали способность синтеза вторичных соединений, а именно алкалоидов, в клеточной культуре белены черной. В нашей стране систематические исследования в этой области были начаты Р.Г. Бутенко в 1957 г. в Институте физиологии растений им. К.А. Тимирязева АН СССР, которая получила клеточные культуры женьшеня и ряда других лекарственных растений. До начала 70-х годов спектр соединений, образуемых клеточными культурами в количествах, характерных для целого растения, был очень ограничен. Это ico ia a abacum, в которой некоторые исследователи наблюдали синтез относительно больших количеств никотина (0.7 %), Dioscorea del oidea, накапливающая до 1.6 % диосгенина, Ammi vis aga, содержащая в 20 раз больше виснагина в культуре ткани, чем в растении, и некоторые другие. Экспериментальные данные, накопившиеся к этому периоду, указывали, что биосинтез многих соединений в недифференцированных тканях сильно подавлен, а появление продуктов во многих случаях было связано с регенерацией корней, побегов и других морфологических структур, т.е. с процессом дифференциации ткани. С начала 70-х годов список фармакологически ценных вторичных продуктов биосинтеза, обнаруженных в культурах тканей, значительно расширился. В 80-е годы на основе метода культуры тканей возникли новые направления биотехнологии, важнейшим из которых была клеточная инженерия — генетическое конструирование новых форм. 2. Культивирование растительных клеток и тканейКультуры растительных клеток могут синтезировать самые разнообразные по химической природе вещества. Среди них эфирные масла, фенольные соединения, алкалоиды, стероиды, терпеноиды и др. Но несмотря на то, что биомасса культивируемых клеток с начала 80-х годов используется в качестве источника экономически важных продуктов, ряд трудностей и нерешенных вопросов сдерживает широкомасштабное применение культивируемых клеток, обусловливает нерентабельность биотехнологических производств многих ценных видов растений. Содержание практически важных вторичных метаболитов в высших растениях определяется активностью их синтеза, эффективностью транспорта и депонирования в органах запаса растения. Все эти признаки определяются генетически, находятся под контролем развития организма и максимально реализуются в оптимальных внешних условиях.2.1 Понятие культуры клеток и тканейВ самом общем смысле культура клеток и тканей – это искусственное i vi ro индуцирование делений клеток или выращивание в пересадочной культуре тканей, возникших путём пролиферации клеток изолированных сегментов разных частей растения. Все объекты, культивируемые i vi ro, выращиваются стерильными. Стерилизуются исходные кусочки ткани растений (экспланты), питательная среда; антисептически в специальных боксах стерильным инструментом проводятся манипуляции по выращиванию объектов. Сосуды в которых культивируются ткани и клетки, закрываются так, чтобы предотвратить инфицирование в течение продолжительного времени. В культуре тканей лекарственных растений можно выделить три главных направления: получение недифференцированной каллусной массы, создание источников генетического разнообразия форм растений, а так же клеточную селекцию и клональное микроразмножение растений.
В природе каллусообразование – естественная реакция на повреждение растений. В культуре изолированных тканей при помещении экспланта (т. е. фрагмента ткани или органа) на питательную среду его клетки дедифференцируются, переходят к делению, образуя однородную недифференцированную массу – каллус. В асептических условиях каллус отделяют и помещают на поверхность агаризованной питательной среды для дальнейшего роста. В результате получают культуру каллусной ткани, которую можно поддерживать неограниченно долго, периодически разделяя её на трансплантаты и пересаживая её на свежую среду. Каллусы легко образуются на эксплантах из различных органов и частей растений: отрезков стебля, листа, корня, проростков семян, фрагментов паренхимы, тканей клубня, органов цветка, плодов, зародышей и т. д. Культивирование каллусных клеток проводят главным образом двумя способами: на агаризованных питательных средах или различных гелеобразующих подложках (силикагель, биогели, полиакриламидные гели, пенополиуретан и др.) и в жидкой питательной среде. В жидкой питательной среде каллус легко распадается на отдельные агрегаты клеток и даёт начало так называемой суспензионной культуре. Каллусные клетки в культуре i vi ro подвержены значительной генетической изменчивости. Изменчивость геномов может приводить к генетическим изменениям у растений-регенерантов, полученных из культуры каллусных клеток, клеточных суспензий или изолированных протопластов. Такие растения получили названия сомаклональных вариантов. Сомаклональные варианты, сохраняя основные свойства прототипа, часто выгодно отличаются от него устойчивостью к болезням, экологическим стрессам, а иногда несколько изменённой биосинтетической способностью и более высокой продуктивностью. Неотселектированные недифференцированные клетки накапливают, как правило, незначительное, по сравнению с интактным растением, количество веществ специализированного обмена. Только благодаря правильно разработанной стратегии получения высокопроизводительных штаммов к настоящему времени получены культуры тканей, в которых содержание вторичных продуктов достаточно велико, чтобы служить лекарственным сырьем. Однако для многих культур неоднократные попытки различных исследователей определить условия накопления продуктов, характерных для родительских растений, были неудачными. Это касается, в частности, индукции морфинановых алкалоидов в культуре ткани Papaver som iferum, винбластина — в Ca hara hus roseus, хинолиновых алкалоидов — в Ci cho a ledgeria a, дигоксина — Digi alis la a a и др. Чаще всего в клеточных культурах при длительном культивировании снижается или совсем теряется способность клеток накапливать соединения вторичного метаболизма из-за возникновения малоактивных, но более жизнеспособных вариантов. Снижение биосинтетического потенциала в культуре i vi ro происходит из-за подавления дифференциации клеток и их специализации, т.е. в результате потери способности к реализации генетической информации, относящейся ко вторичному обмену. Важной характеристикой клеточной популяции является ее стабильность в отношении синтеза, транспорта и депонирования метаболитов « интереса».
Все растительные ингредиенты перемешать и измельчить. 4 столовые ложки полученного лекарственного сырья залить 1 л кипятка, настаивать в течение 3 часов и процедить. Принимать 3 раза в день по 1/3 стакана. Рецепт 13 • Ягоды черной смородины – 100 г; • Мед – 100 г. Смородину промыть, измельчить и смешать с медом. Полученное средство принимать на протяжении 2–3 месяцев 3 раза в день за 30 минут до еды по 1 чайной ложке. Рецепт 14 • Корень хрена – 1 кг. Хрен очистить и натереть на терке, залить 3 л кипятка и настаивать в течение суток, укутав теплым одеялом. Полученное средство процедить и принимать в течение недели 3 раза в день до еды по 1/2 стакана. Средство особенно эффективно при остром инфекционном гепатите. Рецепт 15 • Корень солодки голой – 2 столовые ложки; • Цветки ромашки аптечной – 2 столовые ложки; • Трава чистотела большого – 4 столовые ложки; • Трава зверобоя продырявленного – 4 столовые ложки; • Листья мяты перечной – 4 столовые ложки. Ингредиенты перемешать и измельчить. 3 столовые ложки полученного сбора залить 500 мл кипятка, поставить на кипящую водяную баню и нагревать в течение 30 минут
2. Источники финансирования учреждений культуры и культур-ных программ. Технология планирования
3. Лекарственные вещества, угнетающие центральную нервную систему
4. Химия в биологии, медицине и в производстве лекарственных веществ
5. Культура как детерминанта развития общества. Проблемы культуры и социума
9. Значение лекарственных веществ и лекарственных форм, содержащих антибиотик
10. Общая характеристика природных соединений, используемых в качестве лекарственных веществ
12. Фармакология лекарственных веществ
13. Культура – источник противоречий
14. Дендизм в контексте культуры (литературные источники)
16. Культура Казахстана 19 века
18. Культура и быт Тамбовского края в XVIII в.
20. Культура России в 19 веке. Развитие исторической науки
21. Усиление борьбы в России сторонников западных ценностей жизни против русской национальной культуры
25. Хип-хоп культура. Возникновение хип-хопа
26. Ценообразование в сфере культуры
27. Расцвет критического реализма в театральной культуре и литературе России
29. Культура Древней Греции (XXX-IV вв.)
32. Культура Индии
34. Структура культуры. Классификация ее видов
35. Культура: особенности и значение, взгляды и понятия
36. Массовая и Элитарная культура
42. Сравнительный анализ культуры Средневековья и Возрождения
43. Проблемма адаптации "чужого" в русской культуре XVIII века
44. Мусульманский тип культуры
45. Внутренняя и внешняя культура
47. Духовная и художественная культура Древней Греции
48. Естественная и гуманитарная культуры. Научный метод
49. Имя - средство закрепления и систематизации фактов культуры
50. Концепция культура Карла Юнга
51. Культура
52. Культура
53. Культура барокко
57. Культура древних цивилизаций (Шпаргалка)
58. Культура как предмет исследования
59. Культура как социальное явление. Ее основные функции
60. Культура первобытного общества
61. Культура ранних человеческих цивилизаций (Контрольная)
62. Культура России начала XIX века
63. Культура Руси XIV - XVII веков
64. Культура русской дворянской усадьбы
66. Культура эпохи Возрождения и Реформации
67. Культурогенез и ценности культуры
68. Многообразие и многозначность культуры
69. Основные черты и значение "Серебряного века" для культуры России
73. Психологические трактовки культуры
75. Русская культура в начале XX века: Символизм. Религиозные течения в философии
76. Русское юродство как феномен культуры, его национальное значение
77. Феномен любви в русской национальной культуре
78. Хозяйство и материальная культура австралийцев до прихода европейцев
80. Цивилизация Ацтеки. Особенности ее культуры
81. Культура и искусство Японии
82. Культура Ассирии
83. Особенности культуры Китая
85. Культура в современном её понимании
89. Микенская культура как начало европейской цивилизации
90. Культура Индии
91. Отличие культурологии от других наук, изучающих культуру
92. Культура как фактор общения
93. Культура Доколумбовой Америки
94. Искусство эллинской культуры
95. Культура "Серебряного века"
96. Очерк из истории Русской культуры советского и постсоветского периода