|
|
|
сделать стартовой | добавить в избранное |
 |
|
Хламидиоз. Методы определения/диагностики |
Брелок LED "Лампочка" классическая. 
Ручка "Помада". ХЛАМИДИОЗ - СОВРЕМЕННЫЕ ПОДХОДЫ К ДИАГНОСТИКЕ И ЛЕЧЕНИЮ Цитоскопические методы обнаружения хламидий При цитоскопическом методе одновременно с поиском цитоплазматических клеток-включений Провачека учитывается количество лейкоцитов как показателя воспаления, а также дополнительная информация о наличии сопутствующей бактериальной микрофлоры, дрожжеподобных грибов, трихомонад и т.п. Показания: Острая фаза заболевания. Материалом для исследования служат соскобы из уретры у мужчин и уретры и /или цервикального канала у женщин. Материал берут специальными щеточками или ложечками Фолькмана. Выделения из цервикального канала удаляются ватным тампоном. Щеточка вводится в канал на 1-2 см, вращается 15 секунд . Соскобный материал распределяется на предметном стекле, высушивается на воздухе и фиксируется в метаноле или холодном ацетоне. Наиболее популярна окраска по Романовскому-Гимзе. После окраски препараты просматриваются в световом микроскопе, используя иммерсионный объектив (х90). При этом цитоплазма клеток окрашивается в голубой цвет, ядра в фиолетово-синий, цитоплазматические включения определяются в виде темно-синих или розовых микроколоний на фоне голубой цитоплазмы. На стадии элементарных включения хламидий окрашиваются в розовый цвет, на стадии элементарных телец -в синий. Цитоскопический метод широко доступен, но эффективен лишь при острых формах инфекции, значительно менее эффективен и информативен при хронических формах заболевания При урогенитальном хламидиозе частота обнаружения телец Провачека в соскобах уретры и цервикального канала не превышает 10-12 %. Наличие этих телец подтверждает диагноз хламидиоза, однако их отсутствие не исключает наличие инфекции. Прямая иммунофлюоресценция (ПИФ) Этот метод предусматривает прямое выявление антигенов хламидий. При люминесцентной микроскопии включения хламидий определяются в виде зеленой или желто-зеленой флюоресценции включений на коричнево-оранжевом фоне цитоплазмы клеток Включения могут иметь зернистую гомогенную или смешанную структуру. Показаниями для диагностики хламидийной инфекции этим методом являются: 1.Острая фаза заболевания. 2.Хроническая фаза заболевания 3 Установление этиологии хронического инфекционного процесса урогенитального тракта 4. Беременность с отягощенным акушерским анамнезом 5. Бесплодие неясного генеза. Диагностическая информативность ПИФ связана с тем, что с ее помощью выявляются не только корпускулярные, но и растворимые антигены хламидий Этот метод не зависит от возможного изменения тинкториальных свойств микроорганизма в процессе заболевания и лечения. ПИФ-метод является важнейшим скриннинговым методом диагностики урогенитального хламидиоза. Его чувствительность и специфичность при использовании моноклональных антител составляет соответственно 65-90% и 85-90%. При оценке результатов следует учитывать, что только показатели внутриклеточной флюоресценции могут оцениваться в качестве положительного результата этого теста при использовании поликлональных антихламидийных антител, при использовании моноклональных - результат считают при наличии 10 ЭТ в поле зрения.
Соскобные препараты готовят также, как и для цитоскопических исследований. Выпускают диагностические наборы, содержащие моноклональные антитела для ПИФ, следующие фирмы: Syva, Drfco, Kallas ad, Bar rels, Boo s cell ech, Califor ia I egra ed Diag os ics, Orio Diag os ica. Реагенты фирм Syva, Difco, Kallas ad представляют собой меченные ФИТЦ моноклональные антитела к основному белку наружной мембраны хламидий, а реагенты других фирм - моноклональные антитела к родоспецифическому хламидийному липолисахариду (ЛПС). В России ЗАО “НИАРМЕДИК плюс” при НИИЭМ им. Н.Ф. Гамалеи РАМН выпускает моноклональные антитела к ЛПС хламидий, которые успешно конкурируют с продукцией иностранных фирм по качеству продукции. Это набор “Хламоноскрин” для определения моноклональных антител к родоспецифическому липополисахаридному антигену и набор “Хламоноскрин-2” для определения моноклональных антител к видоспецифическому белковому антигену хламидий трахоматис. Наборы имеют ФС 42-359598 и регистрационное удостоверение Минздрава России 93/ 270/ 9 . Моноклональные антитела отличаются друг от друга по вызываемой яркости свечения, постоянству выявляемых форм ЭТ и степени специфичности. Для диагностики хламидий этим методом необходим люминесцентный микроскоп. В целом, метод ПИФ отвечает критериям высокой чувствительности и специфичности, но требует исполнения опытным, компетентным лабораторным работником. Высококвалифицированная экспертная оценка методом ПИФ редко бывает доступной, поэтому средняя чувствительность его снижается. Метод недостаточно чувствителен и для стабильного определения малых количеств ЭТ. К тому же невозможно проверить и отрицательные результаты, и, следовательно, обнаружить среди них ложноотрицательные, что приводит к снижению чувствительности. Иммуноморфологические методы Эти методы основаны на обнаружении антигенных субстанций хламидий в эпителии и других тканях путем обработки препаратов специфическими антителами. Антитела диагностической антихламидийной сыворотки соединены с какой-либо меткой - люминесцирующей (ФИТЦ-антитела) или ферментной (энзим-меченые антитела). Непрямой метод иммунофлюресценциии Непрямой метод иммунофлюресценции применяют в тех случаях, когда нет в наличии ФИТЦ-конъюгата антихламидийных антител. В этих случаях приготовленный тем же методом, что и для ПИФ препарат из клинических проб обрабатывают вначале антихламидийными антителами, полученными путем иммунизации хламидиями овец, кроликов, мышей или других животных, а затем второй сывороткой, специфичной для вида животного, которое было иммунизировано хламидиями. Антитела второй сыворотки конъюгированы с ФИТЦ. Показания к применению и специфичность данного метода совпадают с ПИФ. Диагностика хламидий на культуре клеток МсСоу Одним из лучших, но в то же время наиболее трудоемким является метод диагностики хламидий путем изоляции возбудителя на культуре клеток, обработанных различными антиметаболитами (“золотой стандарт”) Для этой цели обычно используют чувствительную культуру клеток, обработанную циклогексимидом. Чувствительность культурального метода по сравнению с ПЦР составляет 70-80%, но в то же время он превосходит молекулярно-биологические методы диагностики по специфичности.
В литературе описаны случаи выявления хламидий трахоматис методом ПЦР при отрицательных результатах культурального теста и наоборот. Показаниями для диагностики хламидийной инфекции этим методом являются: 1 Беременность с отягощенным акушерским анамнезом. 2. Оценка эффективности проведенного антибактериального лечения. 3. Выявление чувствительности и резистентности к антибактериальным препаратам. 4. Выявление хламидий у ВИЧ-инфицированных или лиц со вторичными иммунодефицитными состояниями (онкологические больные после проведенных курсов лучевой и химиотерапии, трансплантации костного мозга; лица, получающие иммунодепрессанты; больные вирусным гепатитом и туберкулезом). 5. Бесплодие неясного генеза. 6. Установление этиологии хронического инфекционного процесса урогенитального тракта. Культуральный посев является референс-методом при оценке эффективности антибактериального лечения. При исследовании биопроб методом ПЦР после курса химиотерапии в некоторых случаях можно получить “ложноположительные с клинической точки зрения” результаты. Это связано с тем, что невозможно однозначно оценить жизнеспособность и патогенность микробной клетки на основании выявления фрагмента ее генома, используя только данные молекулярно-биологических методов. В этом случае при исследовании клинического материала с помощью культурального посева микробные клетки, потерявшие эти важные с клинической точки зрения свойства, не дадут роста в клеточной культуре. Для транспортировки и хранения клинического материала используют специальную питательную среду (транспортная среда). Она разливается в пенициллиновые флаконы по 1 мл и хранится при температуре 4 ° С (в общей камере бытового холодильника) в течение 2-х месяцев. Состав транспортной среды: среда MEM с добавлением 10% сыворотки крупного рогатого скота и антибиотика гентамицина концентрации 50 мкг/мл . Клинический материал после перенесения в транспортную среду хранится в общей камере холодильника при температуре 4 ° С и, в течение двух суток должен быть доставлен в лабораторию. Процедура посева 1. Обработка однодневной клеточной культуры МсСоу 1% раствором ДЕАЕ декстраном в течение 30 минут. 2. Заражение обработанных клеток материалом, полученным от больных. 3. Центрифугирование зараженных клеток при 2500 g в течение 45 минут. 4. Отмывка клеток питательной средой. 5. Добавление к клеткам ростовой среды, содержащей циклогексимид. 6. Инкубирование клеток в течение двух суток при 36 ° С. 7. Обнаружение хламидий в клетках методом прямой иммунофлюоресценции или ПЦР. Реальный срок получения результатов этим методом - семь дней. В настоящее время в литературе растет число сообщений о случаях резистентности хламидий к антибактериальным препаратам (эритромицину, тетрациклину, доксициклину, фторхинолонам). Ценность культурального метода состоит в том, что он является пока единственным методом, позволяющим выбрать антибактериальный препарат для лечения хламидийной инфекции и оценить эффективность антибактериальной терапии. Схема метода выявления устойчивости хламидий трахоматис к антибактериальным препаратам -Хламидийным изолятом, выделенным от больного при посеве, заражают чувствительные клетки.
Барону империи Жану Корвизару нельзя отказать в проницательности не случайно же он был личным врачом Наполеона I. Метод перкуссии получил всеобщее признание, и ему было суждено войти в практику в качестве одного из основных приемов диагностики. Мало кому известно, что Ауэнбруггер указал на возможность лечения душевных болезней камфарой. Значение открытия замечательного скромного венского врача трудно переоценить. Другой выдающийся венский врач чешского происхождения Йозеф Шкода (18051881), опираясь на достижение Ауэнбруггера, аускультацию, расширил методы физической диагностики. Он заявил в противоположность существовавшему до него мнению, что «физические явления в больном организме не составляют еще самой болезни, наоборот, они только являются выражением определенных физических состояний, которые в свою очередь обусловлены болезненными изменениями». Благодаря этому, симптомы снова заняли надлежащее положение в патологии, которая в то же время стала изучаться более с клинической, нежели с теоретико-естественно-исторической стороны
1. Методы определения экономической и психологической эффективности продвижения товаров
3. Методы определения возраста земли и Вселенной
9. Метод определения спроса на основе анализа цен и объемов продаж
10. Методы определения и измерения сильных сторон личности
11. Спутниковые методы определения координат
12. Методы определения базовой цены товара
13. Методы определения элементарного электрического заряда
14. Совершенствование методов определения кредитоспособности заемщиков
15. Методы определения содержания свинца, цинка, серебра в питьевой воде
16. Стандартизация измерения рН в неводных средах. Методы определения рН стандартных буферных растворов
Трусики-подгузники Merries (L), 9-14 кг, 44 штуки. 
Пенал школьный "Pixie Crew" с силиконовой панелью для картинок (фуксия, горох). 
Набор из скатерти и салфеток "Рябина" 140x180/42x42 см. 17. Железо в почвах. Методы определения железа
19. Кинетические методы определения загрязнителей в различных природных средах
20. Методы определения запасов материально-технических ресурсов при функционировании MRP
21. Экономическая сущность и методы определения эффективности использования оборотных средств
26. Педиатрия (перинатальный хламидиоз)
27. Хламидиоз
28. Антибактериальная терапия хламидиозов
29. Хламидиоз
30. Хламидиоз крупного рогатого скота
31. Хламидиоз овец
32. Вычисление определенного интеграла методами трапеций и средних прямоугольников
Этикетки самоклеящиеся "ProMEGA Label", А4, 1 штука, 25 листов, белые. 
Настольная игра "Кролики и норы". 
Моющее дезинфицирующее средство "Ника-Экстра М", 1 л. 34. Метод моментов в определении ширины линии магнитного резонанса
35. Кредитоспособность ссудозаёмщика и методы её определения
36. Кредитоспособность ссудозаемщика и методы ее определения
37. Определение наиболее эффективных форм и методов организованной преступности
41. Методы запоминания экономических и юридических статей, правил, определений, теорем
42. Половая конституция человека и методы ее определения
48. Вычисление определенного интеграла методом трапеций
Ручка-стилус шариковая "Самая лучшая!". 
Клей ПВА, 500 грамм. 
Мультиплеер "Мамонтенок". 49. Определение рационального метода лечения на основе истории болезни
50. Метод А.Ф. Смирнова для определения критических нагрузок в стержневых системах
51. Определение коэффициента вязкости прозрачной жидкости по методу Стокса
52. Методы и проблемы определения рекреационной специализации района
53. Химический метод Винклера для определения растворенного кислорода
57. Исследование клеточного цикла методом проточной цитометрии
58. Определение активности ферментов
61. Обзор методов и способов измерения физико-механических параметров рыбы
62. Новейшие методы селекции: клеточная инженерия, генная инженерия, хромосомная инженерия
63. Виды стихийных бедствий и методы борьбы с ними
64. Великобритания (расширенный вариант реферата 9490)
Чайник со свистком ЕМ-25001/17, (2,5 л). 
Автокресло Еду-Еду "KS-516 Lux" с вкладышем (цвет: синий, принт: графити, 9-36 кг). 
Патронташ со стопками. 65. Методы и модели демографических процессов
66. Гамма – каротаж. Физические основы метода
68. Добыча золота методами геотехнологии
69. Инженерно-геологические изыскания для определения характеристик грунтов и оснований
73. Нелегальная миграция в России и методы борьбы с ней
74. Предмет и метод гражданского права
75. Определения суда первой инстанции
76. Предмет, метод и система гражданского процессуального права /Украина/
77. Корпорация BBC. Формы и методы государственного контроля вещания
78. В чем сложность налога на добавленную стоимость (в определении и собирании)
79. Правовые нормы: определение, признаки, виды
80. Методы комплексной оценки хозяйственно-финансовой деятельности
Ночник с проектором "Звездочка". 
Машина-каталка "Авторалли", цвет: розовый. 
Кружка фарфоровая "Парижские улочки", 500 мл. 81. Цикл-метод обучения. (Методика преподавания эстонского языка)
82. Специфика преподавания иностранного языка и метод проектов
83. Естественная и гуманитарная культуры. Научный метод
84. Соцреализм как метод искусства
85. Дидактические возможности отдельных методов обучения на уроках литературы в старших классах
89. Метод комплексного археолого-искусствоведческого анализа могильников
91. Методы компьютерной обработки статистических данных. Проверка однородности двух выборок
92. Методичка по Internet Explore
94. Определение подозрительных пакетов, анализ протоколов сети
95. Определение эффективности применения информационной технологии
96. Метод деформируемого многогранника
Настольная игра "Хватайка". 
Глобус политический, диаметр 320 мм. 
Таблетки для посудомоечной машины "Clean&Fresh", 5 in1 (midi). 98. Методы прогнозирования основанные на нейронных сетях
99. Модифицированный симплекс-метод с мультипликативным представлением матриц
Совок большой. 
