Библиотека Рефераты Курсовые Дипломы Поиск
Библиотека Рефераты Курсовые Дипломы Поиск
сделать стартовой добавить в избранное
Кефирный гриб на сайте www.za4et.net.ru

Биология Биология

Методи исследования клеток

Ручка "Помада".
Шариковая ручка в виде тюбика помады. Расцветка корпуса в ассортименте, без возможности выбора!
25 руб
Раздел: Оригинальные ручки
Совок №5.
Длина совка: 22 см. Цвет в ассортименте, без возможности выбора.
18 руб
Раздел: Совки
Фонарь желаний бумажный, оранжевый.
В комплекте: фонарик, горелка. Оформление упаковки - 100% полностью на русском языке. Форма купола "перевёрнутая груша" как у
87 руб
Раздел: Небесные фонарики

Вступление Раздел I Микроскопические исследования как метод познания клетки 1.1 Световая микроскопия и ее возможности 1.1.1 Обычная оптическая микроскопия 1.1.2Флуоресцентная микроскопия 1.1.3 Фазово-контрастная и интерференционная микроскопия 1.2 Электронная микроскопия 1.3 Рентгеноскопия Раздел II Методы изучения химической среды живых клеток 2.1 Использование ядерного магнитного резонанса (ЯМР) для определения химических условий в живых клетках 2.2 Использование внутриклеточных электродов 2.3 Использование светоизлучающих индикаторов Раздел III Методы культивирования клеток и определения их состава 3.1 Методы культивирования клеток 3.2 Фракционирование клеточного содержимого Раздел IV. Технология рекомбинантных ДНК 4.1 Выделение и фракционирование ДНК 4.2 Расщепление ДНК рестрицирующими нуклеазами 4.3 Секвенирование ДНК Вывод Список использованной литературы Вступление Клетки очень малы по размеру и сложно устроены: трудно рассмотреть их структуру, трудно определить молекулярный состав и еще труднее установить, как функционируют их отдельные элементы. Для изучения клеток разработано множество экспериментальных методов, возможности которых определяют уровень наших знаний в этой области. Успехи в изучении биологии клетки, включая наиболее удивительные достижения последних лет, как правило, связаны с применением новых методических подходов. Поэтому для понимания клеточной биологии необходимо иметь некоторое представление о соответствующих экспериментальных методах. Целью нашей работы мы поставим рассмотрение современных методов, используемых для изучения клеток. Мы рассмотрим современные методы, используемые для изучения клеток. Мы начнем знакомиться с теми из них, которые позволяют изучать клетку как единое целое, и затем обратимся к анализу составляющих клетку макромолекул. Отправной точкой станет микроскопия, поскольку клеточная биология началась со световой микроскопии, и этот метод до сих пор остается весьма эффективным инструментом исследования, наряду с более современными устройствами для получения изображения, основанными на электронных пучках или иных формах излучения. От пассивного наблюдения мы постепенно перейдем к методам, предполагающим активное вмешательство: рассмотрим, как клетки различных типов могут быть отделены от ткани и при этом сохранять способность расти, узнаем, как клетки можно разрушить, а клеточные органеллы и составляющие их макромолекулы выделить в чистом виде. И, наконец, мы изложим суть технологии рекомбинантных ДНК, благодаря которой стало возможным выделять, секвенировать и манипулировать генами и, следовательно, изучать механизмы их действия в клетке. Также мы систематизируем их, выделим основные вехи, которые удалось достигнуть благодаря их применению. Раздел I. Микроскопические исследования как метод познания клетки Диаметр типичной клетки животных составляет 10-20 мкм, что в пять раз меньше мельчайшей видимой частицы. Только с появлением совершенных световых микроскопов в начале XIX века удалось установить тот факт, что все ткани животных и растений состоят из отдельных клеток. Это открытие, обобщенное в форме клеточной теории Шлейденом и Шванном в 1838 году, знаменует собой начало клеточной биологии.

Будучи чрезвычайно малыми по размерам, животные клетки к тому же бесцветны и прозрачны: следовательно, открытие их основных структур стало возможным благодаря разработке набора красителей в конце XIX столетия. Именно красители обеспечили достаточный контраст для наблюдения субклеточных структур. Сходная ситуация наблюдалась в начале 40-х годов нашего столетия, когда изобретение мощного электронного микроскопа потребовало новых методов сохранения и окраски клеток. И только после того, как они были разработаны, начала проявляться вся сложность клеточной структуры. В основе микроскопии как методологии до сих пор лежат способы приготовления образца и возможности самого микроскопа. 1.1 Световая микроскопия и ее возможности 1.1.1 Обычная оптическая микроскопия В общем случае излучение данной длины волны может быть использовано для изучения только таких структур, минимальные размеры которых еще сопоставимы с длиной волны самого излучения. Этот принцип ограничивает возможности любого микроскопа. Предел разрешения светового микроскопа задается длиной световой волны, которая для видимого света лежит в пределах от 0,4 мкм (фиолетовый) до 0,7 мкм (темно-красный). Из этого следует, что самыми маленькими объектами, которые еще можно наблюдать в световой микроскоп, являются бактерии и митохондрии (их ширина ~ 0,5 мкм). Более мелкие элементы клетки искажаются эффектами, вызванными волновой природой света. Для приготовления постоянного препарата, который можно окрасить и наблюдать в микроскоп, клетки обрабатывают фиксирующим агентом с тем, чтобы иммобилизировать, убить и сохранить их. В современных методах, как правило, используется обработка альдегидами, например, формальдегидом или глутаральдегидом, которые формируют ковалентные связи со свободными аминогруппами белков и, таким образом, сшивают соседние молекулы. После фиксации ткани обычно режут на очень тонкие &quo ;ломтики&quo ; (срезы) на микротоме. Срезы толщиной от 1 до 10 мкм помещают на поверхность предметного стекла. В качестве заключающих сред используют парафин или специальную смолу. В жидком виде эти среды пропитывают и окружают фиксированную ткань: затем они затвердевают при охлаждении или за счет полимеризации, образуя твердый блок, который удобно резать на микротоме. Существует серьезная опасность того, что процедуры фиксации или заключения могут повредить структуру клеток или клеточных макромолекул. Вот почему предложен другой метод приготовления срезов - быстрое замораживание. Замороженную ткань режут на криостате в специальном микротоме, установленном в холодной камере. В содержимом большинства клеток, состоящих, как правило, на 70% из воды, практически отсутствуют компоненты, способные помешать прохождению световых лучей. Поэтому в естественном состоянии большинство клеток даже после фиксации и приготовления срезов практически невидимы в обычном световом микроскопе. Одна из возможностей их увидеть состоит в окраске клеток красителями. 1.1.2Флуоресцентная микроскопия Поскольку большинство макромолекул представлены в клетках относительно незначительным числом копий, одна или две молекулы красителя, связанные с макромолекулой, могут оставаться незамеченными.

Альтернативный подход к проблеме чувствительности состоит в использовании флуоресценции. Флуоресцирующие красители поглощают свет одной длины волны и излучают свет другой длины волны, более длинной. Если такое вещество облучить светом, длина волны которого совпадает с длиной волны света, поглощаемого красителем, и затем для анализа использовать фильтр, пропускающий свет с длиной волны, соответствующей свету, излучаемому красителем, флуоресцирующую молекулу можно выявить по свечению на темном поле. Высокая интенсивность излучаемого света является характерной особенностью таких молекул. Применение флуоресцирующих красителей для окраски клеток предполагает использование специального флуоресцентного микроскопа. Такой микроскоп похож на обычный световой микроскоп, но здесь свет от осветителя, излучаемый мощным источником, проходит через два набора фильтров - один для задержания света перед образцом и другой для фильтрации света, полученного от образца. Флуоресцентная микроскопия часто используется для выявления специфических белков или других молекул, которые становятся флуоресцирующими после ковалентного связывания с флуоресцирующими красителями. Например, флуоресцирующие красители могут быть связаны с молекулами антител, что сразу же превращает их в высокоспецифические и удобные красящие реагенты, селективно связывающиеся со специфическими макромолекулами на поверхности живой либо внутри фиксированной клетки. Для этой цели обычно используют два красителя - флуоресцеин, который дает интенсивную желто-зеленую флуоресценцию после возбуждения светло-голубым светом, и родамин, обусловливающий темно-красную флуоресценцию после возбуждения желто-зеленым светом. 1.1.3 Фазово-контрастная и интерференционная микроскопия Возможность потери или нарушения образцов в процессе их приготовления всегда беспокоила микроскопистов. Единственный способ решить эту проблему состоит в изучении живых клеток без фиксации или замораживания. Для этой цели очень полезны микроскопы со специальными оптическими системами. При прохождении света через живую клетку фаза световой волны меняется согласно коэффициенту рефракции клетки: свет, проходящий через относительно тонкие или относительно толстые участки клетки, такие, как ядро, задерживается, и его фаза соответственно сдвигается по отношению к фазе света, проходящего через относительно тонкие участки цитоплазмы. Как в фазово-контрастном, так и в интерференционном микроскопе используются эффекты интерференции, возникающие при рекомбинации двух наборов волн, которые и создают изображение клеточных структур. Оба типа световой микроскопии широко используются для наблюдения живых клеток. Простейший способ разглядеть детали клеточной структуры - наблюдать свет, рассеивающийся различными компонентами клетки. В темнопольном микроскопе лучи от осветителя направляются сбоку и при этом в линзы микроскопа попадают только рассеянные лучи. Соответственно клетка выглядит как освещенный объект на темном поле. Одним из основных преимуществ фазово-контрастной, интерференционной и темнопольной микроскопии является возможность наблюдать движение клеток в процессе митоза и миграции Видеокамеры и соответствующие технологии обработки изображения значительно увеличили возможности световой микроскопии.

Советские гистологи внесли большой вклад в познание свойств тканей, вскрыли многие важные закономерности в гистогенезах и особенностях функционирования тканевых структур. Существенно усовершенствованы гистохимические методы исследования, с помощью которых получены данные о развитии, функционировании и патологии тканей.   Предмет, задачи и методы Г. Историческое развитие многоклеточных животных (филогенез) привело к дифференцированию и специализации клеток и обособлению клеточных систем и комплексов, выполняющих определенные функции. Тканями принято считать филогенетически сложившиеся системы клеток, объединённые общей структурой, функцией и происхождением. По этим признакам выделяют: эпителии, образующие внешние или внутренние покровы организма и различные железы, выполняющие защитную, пищеварительную и эндокринную функции; ткани внутренней среды (соединительная ткань, кровь), принимающие основное участие во внутреннем трофике и несущие опорные функции; мышечную ткань, выполняющую сократительную функции; нервную ткань, осуществляющую основную регуляцию жизнедеятельности всех систем организма

1. Методы исследования литературы

2. Психодиагностика. Методы исследования

3. Методы исследований социально-экономических процессов в регионе

4. Математические методы исследования экономики

5. “Идеальные типы” как метод исследования культуры по работам М. Вебера в его избранных произведениях

6. Асимптотические методы исследования нестационарных режимов в сетях случайного доступа
7. Электронно-микроскопические методы исследования в медицине
8. Экзаменационные вопросы и билеты по предмету МАТЕМАТИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ ЭКОНОМИКИ за весенний семестр 2001 года

9. Методы исследования темперамента

10. Микрополосковый метод исследования диэлектрической проницаемости материалов на сверхвысоких частотах

11. Социология религии: статус, предмет, уровни знаний и методы исследования

12. Методы исследования городской среды

13. Предмет экономической географии и региональной экономики. Методы исследований

14. Лекции Математические методы исследования экономики

15. Методы исследования поведения животных

16. Прикладные схемы определения метрологических характеристик ядерно-геофизических методов исследования скважин

Карандаши цветные "Kores", 24 цвета, с точилкой.
Цветные карандаши имеют насыщенные цвета. Шестигранная форма корпуса снижает усталость и придает дополнительный комфорт. Мягкий грифель.
396 руб
Раздел: 13-24 цвета
Мешок для обуви "Kitten", 1 отделение, светоотражающая полоса.
Удобный мешок для обуви со светоотражающей полосой и карманом на молнии. Размер: 370х470 мм. Материал: полиэстер.
400 руб
Раздел: Сумки для обуви
Чехол с поролоном, антипригарный, для гладильной доски (тефлон).
Чехол для гладильной доски антипригарный. Размер чехла: 129х48 см. Максимальный размер доски: 125х40 см. Рисунок ткани в ассортименте без
364 руб
Раздел: Чехлы для гладильной доски

17. Разработка методов исследования характеристик генетического алгоритма распределе-ния цепей по слоям в МСМ

18. Проблема выбора метода исследования при изучении «Языка власти»

19. Опрос - как метод исследования в социологии

20. Гидрохимические методы исследования водоемов

21. Предмет и методы исследования экономической теории

22. Специфика системного метода исследования
23. Ландшафтно-экологические методы исследований
24. Геофизические методы исследования скважин

25. Контент-анализ как метод исследования

26. Методы исследования нелинейных систем

27. Органолептические методы исследования меда

28. Методы исследования потребительского поведения

29. Методы исследования больных с заболеваниями эндокринной системы

30. Методы исследования и симптоматология при заболеваниях сердечнососудистой системы

31. Методы исследования мочевыводящей системы. Исследование в гинекологии и акушерстве

32. Методы исследования сенсорных систем

Пазл "Россия" (Русский), 100 деталей.
Пазлы - это прежде всего обучающие пазлы. С фотографической точностью прорисованы обитатели и растительный мир самых отдаленных уголков
548 руб
Раздел: Пазлы (100-199 элементов)
Каталка-мотоцикл "МХ".
Новая каталка-мотоцикл "МХ" впечатлит вашего малыша. Он сможет почувствовать себя настоящим байкером, ведь эта каталка не просто
2899 руб
Раздел: Каталки
Крем для младенцев "Weleda" для защиты кожи в области пеленания (с календулой), 75 мл.
Крем для младенцев для защиты кожи в области пеленания от WELEDA с экстрактом Календулы лекарственной и Ромашки аптечной эффективно
476 руб
Раздел: Крем детский

33. Методы исследования функции внешнего дыхания

34. Основные физикальные и специальные методы исследования в ангиологии

35. Прямая кишка: анатомия, гистология и методы исследования

36. Свойства артериального пульса и методы исследования артериального давления

37. Сужение левого предсердно-желудочкового отверстия: дополнительные методы исследования и прогноз

38. Диверсифицированные методы исследования систем управления
39. Логико-интуитивные методы исследования систем управления. Метод тестирования
40. Методы проявления системной идеи. Эвристические методы исследования систем управления

41. Специфические методы исследования

42. Методы исследования в педагогике

43. Роль и место физических методов исследования при изучении некоторых разделов химии высокомолекулярных соединений в школе и в вузе

44. Метод исследования газовых скважин при стационарных режимах фильтрации, интерпретация результатов исследования

45. Качественный метод исследования с применением индикаторов. Весовой метод измерения скорости коррозии металлов

46. Методы исследования в психологии

47. Методы исследования личности

48. Методы исследования педагогической психологии

Игра настольная развивающая "Интересные профессии".
Обучающая игра пазл-липучка состоит из 5 игровых полей, заполняя которые, ребенок изучает название и назначение 5-ти известных профессий,
592 руб
Раздел: Человек, профессии
Игровой набор Lalaloopsy "Карусель" для создания украшений из бусинок.
Отличный набор, сочетающий игровые элементы и творчество, позволит Вашей юной мастерице создавать уникальные авторские аксессуары из
1299 руб
Раздел: Современные, герои мультфильмов
Подставка под ванночку "Карапуз" универсальная (с сушилкой).
Подставка для ванночки предназначена для того, чтобы сделать купание Вашего малыша максимально удобным. Она надежна и проста в
1223 руб
Раздел: Горки, приспособления для купания

49. Общие и специальные методы исследования конфликтов с помощью опросника Айзенка

50. Отрасли, методы исследования, задачи психологии

51. Психодиагностические методы исследования личности

52. Психология как наука: объект, предмет, методы исследования. Место психологии в системе наук

53. Современные методы исследования психофизиологии памяти

54. Основные проблемы и методы исследования военной демографии
55. Методы исследования социально-экономических и политических процессов
56. Методы исследования биологически активных соединений

57. Биоиндикация как метод исследования экологических систем

58. Исследование природных ресурсов планеты с помощью космических методов

59. Методологическое значение сравнительного метода в зоологических исследованиях

60. Применение метода частотных диаграмм к исследованиям устойчивости систем с логическими алгоритмами управления

61. Методы поиска и исследований в преподавании физики

62. Исследование метода акустической эмиссии для определения прочности конструкционных керамических материалов

63. Исследование методов охлаждения садки колпаковой печи с помощью математического моделирования

64. Исследование религиоведческой концепции Фрейда - психоаналитического метода в целом

Набор "Юный конструктор № 1", 137 деталей.
Все детали выполнены из прочного и качественного пластика и соединяются между собой при помощи болтов. Из деталей ребёнок сможет собрать
461 руб
Раздел: Воздушный транспорт
Съемный чехол для матраса Зёвушка "Фабрика облаков" (simple).
Съемный чехол на резинке из легкой ткани "Simple" предназначен к детскому матрасу "Зёвушка". Чехол изготовлен из
467 руб
Раздел: Наматрасники
Кружка фарфоровая "FIFA 2018. Забивака. Германия", 480 мл.
Объем: 480 мл. Материал: фарфор.
389 руб
Раздел: Кружки, посуда

65. Методы психологических исследований

66. Исследование помехоустойчивого канала передачи данных методом имитационного моделирования на ЭВМ

67. Контент-анализ как метод конкретных политико-социологических исследований

68. Методы поиска и исследований в преподавании физики

69. Методы научных исследований

70. Методы маркетинговых исследований в регионе
71. Методы алгебраических и дифференциальных уравнений для анализа и качественного исследования социально-экономических явлений (По дисциплине: Математические методы моделирования процессов управления в социальной сфере)
72. Методы политологических исследований

73. Статистические методы анализа результатов психолого-педагогических исследований

74. Методы лучевого исследования, применяемые в стоматологии

75. Исследование мышления больных шизофренией методом пиктограмм

76. Методы психологических исследований

77. Характеристика методов психологического исследования

78. Исследование мышления больных шизофренией методом пиктограмм

79. Методы психологических исследований

80. Основные методы психологических исследований

Набор эмалированных кастрюль "Mayer & Boch" (3 предмета).
Набор эмалированных кастрюль с крышками из термостойкого стекла. Кастрюли - 3 штуки, стеклянные крышки - 3 штуки. Материал: углеродистая
844 руб
Раздел: Наборы кастрюль
Асборн - карточки. Дорисуй, найди, раскрась.
В этом наборе вы найдёте 50 многоразовых двусторонних карточек с яркими добрыми картинками животных, а также фломастер на водной основе.
389 руб
Раздел: Прочие
Устройство для контроля над питанием "Хрюшка-диетолог".
Вы стараетесь придерживаться определенной диеты и не есть вечером после шести? Тогда «Хрюшка-диетолог» станет дополнительным средством,
324 руб
Раздел: Прочее

81. Исследование помехоустойчивого канала передачи данных методом имитационного моделирования на ЭВМ

82. Виды социологического исследования: общая характеристика, классификация, характеристика одной из групп методов

83. Методы социологических исследований

84. Статистические методы в исследовании потребления населения

85. Контент-анализ, как метод исторического исследования

86. Курс отечественной политэкономии середины XIX-начала XX в. о методе экономического исследования
87. Методы экономических исследований
88. Исследование плотности и прочности горных пород методами зондирования

89. Акушерские исследования. Методы обследования беременных и рожениц

90. Исследование природы индивидуальных различий методом близнецов

91. Методы и условия культивирования изолированных клеток и тканей растений

92. Использование метода люминесцентной микроскопии в исследовании микроводорослей

93. Методы технико-криминалистического исследования

94. Исследование методов оптимизации

95. Сравнительное исследование эффективности методов сортировки Флойда и Шелла

96. Историография, источниковедение, методы исторического исследования

Коробка подарочная "Апрельский Париж".
Коробка подарочная. Материал: мелованный, ламинированный, негофрированный картон плотностью 1100 г/м2. Отделка: полноцветный декоративный
326 руб
Раздел: Коробки
Табурет-подставка детский с ручкой.
На прочный табурет малыш сможет не только сесть, но и встать. Табурет удобно использовать как подставку, легко переносить за ручку.
390 руб
Раздел: Стульчики
Набор цветных карандашей "Noris Club", акварельные, 24 цвета, с кистью.
Детские цветные карандаши в картонной коробке. Серия «Noris Club» предназначена для использования детьми. Специальное защитное белое
573 руб
Раздел: Акварельные

97. Исследование методов разнесенного приема в декаметровом канале связи

98. Кабинетные исследования и методы сбора вторичных данных. Исследование предпочтений студентов в проведении досуга (посредством личных интервью)

99. Маркетинговые исследования методов сегментирования


Поиск Рефератов на сайте za4eti.ru Вы студент, и у Вас нет времени на выполнение письменных работ (рефератов, курсовых и дипломов)? Мы сможем Вам в этом помочь. Возможно, Вам подойдет что-то из ПЕРЕЧНЯ ПРЕДМЕТОВ И ДИСЦИПЛИН, ПО КОТОРЫМ ВЫПОЛНЯЮТСЯ РЕФЕРАТЫ, КУРСОВЫЕ И ДИПЛОМНЫЕ РАБОТЫ. 
Вы можете поискать нужную Вам работу в КОЛЛЕКЦИИ ГОТОВЫХ РЕФЕРАТОВ, КУРСОВЫХ И ДИПЛОМНЫХ РАБОТ, выполненных преподавателями московских ВУЗов за период более чем 10-летней работы. Эти работы Вы можете бесплатно СКАЧАТЬ.