Библиотека Рефераты Курсовые Дипломы Поиск
Библиотека Рефераты Курсовые Дипломы Поиск
сделать стартовой добавить в избранное
Кефирный гриб на сайте www.za4et.net.ru

Биология Биология

Исследование процесса физиологической адаптации бактерий к тяжёлой воде

Забавная пачка денег "100 долларов".
Купюры в пачке выглядят совсем как настоящие, к тому же и банковской лентой перехвачены... Но вглядитесь внимательней, и Вы увидите
60 руб
Раздел: Прочее
Забавная пачка "5000 дублей".
Юмор – настоящее богатство! Купюры в пачке выглядят совсем как настоящие, к тому же и банковской лентой перехвачены... Но вглядитесь
60 руб
Раздел: Прочее
Гуашь "Классика", 12 цветов.
Гуашевые краски изготавливаются на основе натуральных компонентов и высококачестсвенных пигментов с добавлением консервантов, не
170 руб
Раздел: 7 и более цветов

О. В. МОСИН Московская государственная академия тонкой химической технологии им. М.В. Ломоносова, 117571, Москва, просп. Вернадского, д. 86. Изучен процесс физиологической адаптации различных бактериальных штаммов-продуцентов аминокислот, белков и нуклеозидов, относящимся к различным таксономическим группам микроорганизмов (факультативные и облигатные метилотрофные бактерии - Brevibac erium me hylicum и Me hylobacilus flagella um, галофильные бактерии - Halobac erium halobium и бациллы - Bacillus sub ilis) к росту и биосинтезу необходимых соединений на средах, содержащих максимальные концентрации тяжёлой воды. В работе сообщается о методе, который заключается в многоступенчатой адаптации бактерий к дейтерию путём рассева их на средах, содержащих возрастающие концентрации 2Н2O и с последующей селекцией отдельных колоний, выросших на этих средах. В результате применения данного подхода среди исследуемых бактерий были отобраны отдельные штаммы, сохранившие высокие ростовые и биосинтетические способности при росте на 2H2О. Представлены данные по росту и адаптации исследуемых штаммов бактерий как на минимальных средах, содержащих в качестве источников дейтерия 2H2О, (2H)метанол так и на комплексных средах, содержащих (2Н)биомассу метилотрофных бактерий B. me hylicum, полученную в ходе многоступенчатой адаптации к 2H2O. Для данных штаммов при росте на 2Н2О изучен качественный и количественный состав внутриклеточных аминокислот, сахаров и липидов. Ключевые слова: тяжёлая вода; aдаптация; биосинтезВВЕДЕНИЕ В настоящее время во всем мире растет интерес к получению природных соединений, меченных стабильными изотопами (2Н, 13С, 15 , 18O и другие), которые необходимы для разнопрофильных биохимических и диагностических целей, структурно-функциональных исследований, а также для изучения процессов метаболизма клетки . Тенденции к применению стабильных изотопов по сравнению с их радиоактивными аналогами обусловлены отсутствием радиационной опасности и возможностью определения локализации метки в молекуле методами высокого разрешения: спектроскопией ЯМР и лазерной спектроскопией . Это позволило за последние годы повысить эффективность проведения многочисленных биологических исследований de ovo, а также изучать структуру и механизм действия биологически активных соединений (БАС) на молекулярном уровне. Большое значение в этом аспекте имеют природные соединения, содержащие дейтериевую метку, которые удобнее всего получать с использованием микроорганизмов. Именно поэтому разработка путей препаративного получения дейтериймеченых БАС является актуальной задачей для современной биотехнологии. Стоимость биотехнологически полученных изотопномеченых соединений водорода значительно ниже, чем химически синтезированных, что представляет интерес для поиска новых штаммов-продуцентов БАС, устойчивых к высоким концентрациям дейтерия в ростовых средах и для дальнейшего изучения их свойств. С развитием новых биотехнологических подходов появилась возможность использовать полученные в результате мутагенеза или генной инженерии штаммы-продуценты для направленного синтеза дейтериймеченых соединений .

Традиционным подходом при этом остаётся культивирование бактерий на средах, содержащих максимальные концентрации тяжёлой воды или других дейтерированных субстратов, например, . Однако подобные процессы редко применяются в биотехнологии, вследствие наличия ряда трудностей, связанных с адаптацией и культивированием микроорганизмов на средах с максимальными концентрациями 2H2О. Поэтому целый ряд вопросов, которые касаются принципиальной возможности использования различных штаммов-продуцентов БАС для роста и биосинтеза на высокодейтерированных средах, остаются до конца невыясненными. Важной проблемой, требующей скорейшего разрешения, является изучение процессов физиологической адаптации клетки к 2H2О. Известно, что высокие концентрации 2H2О в ростовой среде могут вызвать ингибирование жизненно-важных функций роста и развития многих микроорганизмов . Несмотря на негативный биостатический эффект, оказываемый тяжёлой водой на клетки, некоторые бактерии устойчивы к высоким концентрациям тяжёлой воды в среде , в то время как растительные клетки могут нормально развиваться при концентрациях не более 50-75% 2H2О . Явление адаптации к 2H2О интересно не только само по себе, но оно также позволяет получать уникальный биологический материал, очень удобный для решения задач молекулярной организации клетки с помощью метода ЯМР-спектроскопии. Эти данные послужили основой для выбора объектов исследования в наших экспериментах. Ими являлись генетически маркированные штаммы-продуценты аминокислот, белков и нуклеозидов, относящиеся к различным таксономическим родам микроорганизмов: факультативные метилотрофные бактерии Brevibac erium me hylicum, облигатные метилотрофные бактерии Me hylobacillus flagella um, галофильные бактерии Halobac erium me hylicum и бациллы Bacillus sub ilis. Целью настоящей работы было исследование процесса физиологической адаптации этих продуцентов БАС при росте на средах, содержащих максимальные концентрации тяжёлой воды. Поскольку биосинтетический потенциал используемых штаммов при росте на тяжелой воде к началу проведения данной работы был изучен недостаточно, представляло интерес исследование их способности к синтезу целевых продуктов в условиях максимально дейтерированных сред. Исследования по адаптации к 2H2O метилотрофных бактерий B. me hylicum заложили основу для использования компонентов их (2Н)меченой биомассы, полученной в ходе многоступенчатой адаптации к 2H2O в качестве ростовых факторов для культивирования других микробных продуцентов БАС. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ Объектами исследования служили генетически маркированные штаммы-продуценты аминокислот, белков и нуклеозидов, полученные из Всероссийской коллекции промышленных микроорганизмов (ВКПМ) Государственного научно-исследовательского института генетики и селекции промышленных микроорганизмов: 1. Brevibac erium me hylicum ВКПМ В 5652, лейцинзависимый штамм факультативных метилотрофных бактерий, продуцент фенилаланина. 2. Me hylobacillus flagella um КТ, изолейцинзависимый штамм облигатных метилотрофных бактерий, продуцент лейцина. 3. Bacillus sub ilis В-3157, полиауксотрофный по гистидину, тирозину, аденину и урацилу штамм грамотрицательных бактерий, продуцент инозина.

4. Halobac erium halobium ЕТ 1001, пигментсодержащий штамм галофильных бактерий, способный синтезировать бактериородопсин. Для приготовления питательных сред и адаптации бактерий использовали 2H2O (99.9% 2H), и 2HСl (95.5% 2H) и метанол (97.5% 2H), полученные из Российского научно-исследовательского центра “Изотоп” (Санкт-Петербург, РФ). По необходимости 2H2O очищали от вредных примесей, перегоняя её над перманганатом калия . Стартовым материалом для культивирования галофильных бактерий и бацилл служила (2Н)меченая биомасса метилотрофных бактерий, полученная в условиях многостадийной адаптации на твердых агаризованных средах (2% агар) с 2% метанолом, содержащих ступенчато увеличивающиеся концентрации тяжёлой воды (от 0 до 98% 2Н2О). Полученную таким образом (2Н)меченую биомассу B. me hylicum (выход составил 100 г по влажному весу с 1 л. среды) автоклавировали в 0.5 н. растворе 2HСl (в 2H2O) (08 ати, 30 мин), нейтрализовали 0.1 н. КОН (рН 7.0) и использовали далее в качестве источника ростовых факторов для адаптации и культивирования бацилл и галофильных бактерий. В настоящей работе использовали следующие питательные среды (количества компонентов приведены в г/л): 1. Минимальная среда М9, на основе различных концентраций 2H2O (см. табл. 1 и табл. 2) и добавками 0.5-2% метанола (в зависимости от физиологической потребности бактерий) или метанола: KH2PO4 3; a2HPO4 6; aCl 0.5; H4Cl 1. Среду использовали для культивирования метилотрофных бактерий. 2. Гидролизная среда 1 (ГС1) для культивирования бацилл (на основе 100% 2H2О): глюкоза 120; (2Н)меченая биомасса B. me hylicum 25; H4 O3 30; MgSO4 x 7H2O 20; мел 20. 3. Гидролизная среда 2 (ГС2) для культивирования галофильных бактерий (на основе 100% 2H2О): aCl 250; MgSO4 x 7H2O 20; KCl 2; CaCl2 x 6H2O 0.065; цитрат натрия 0.5; (2Н)меченая биомасса B. me hylicum 20. Культивирование метилотрофных бактерий и бацилл проводили при 370 С в колбах Эрленмейера вместимостью 250 мл с наполнением средой до 50 мл в условиях интенсивной аэрации по методикам , используя в качестве источников дейтерия 2H2O и метанол. В случае с галофильными бактериями их культивирование проводили на 2H2O-среде при освещении лампами дневного света ЛБ-40. После 6-7 суток культивирования клетки отделяли центрифугированием (10000 об/мин, 20 мин). В культуральных жидкостях анализировали секретируемые аминокислоты и нуклеозиды. Для выделения фракции суммарных белков биомассы клетки дважды промывали дистиллированной водой с последующим центрифугированием (10000 об/мин, 20 мин), экспонировали ультразвуком при 22 кГц (3 x 15 мин) и центрифугировали. Липиды и пигменты экстрагировали смесью органических растворителей хлороформ-метанол-ацетон (2:1:1) по методу Блайя и Дайера . Полученный осадок высушивали до постоянного веса (10-12 мг) и использовали его в качестве фракции суммарных белков биомассы. Суммарные белки биомассы гидролизовали в запаянных стеклянных ампулах в 50-ти кратном избытке 6 н. 2HCl (в 2H2O). Ампулы выдерживали при 1100 в течение 24 ч. После этого реакционную массу суспендировали в горячей дистиллированной воде, фильтровали.

Существует множество определений адаптации. Это связано с тем, что данный феномен является предметом исследования многочисленных научных направлений. В соответствии с этим имеются и разнообразные классификации адаптаций, в зависимости от того, какие критерии положены в их основу. Различные авторы выделяют такие типы адаптаций, как биологическая, физиологическая, биохимическая, психологическая, социальная и т.Pп. Для экологической физиологии наибольший интерес представляет физиологическая адаптация, под которой понимают устойчивый уровень активности физиологических систем, органов и тканей, а также механизмов управления, которые обеспечивают возможность длительной активной жизнедеятельности организма человека и животного в измененных условиях существования (общеприродных и социальных), а также способность к воспроизведению потомства. Однако следует учитывать, что физиологическая адаптация это широкое понятие. Оно включает ряд индивидуальных адаптаций: видовых, наследственно закрепленных и популяционных. Вместе с тем исследование механизмов адаптационных процессов указывает на то, что невозможно судить об адаптации человека, не учитывая психологических, биохимических и других аспектов

1. Физиологическая адаптация нового RuMP штамма факультативных метилотрофных бактерий Brevibacterium methylicum к тяжелой воде

2. Примеры изменений типов русловых процессов

3. Вирусы и бактерии. Проблемы СПИДа

4. Бактерии

5. Литические взаимодействия сапротрофных бактерий и дрожжей в естественных экосистемах

6. Где живут бактерии
7. Общая характеристика бактерий
8. Використання гематоксиліну для діагностики бактеріального вагінозу

9. Спосіб лікування бактеріального вагінозу у вагітних з не виношуванням вагітності

10. Метилотрофные бактерии - источники изотопно-меченных Н-2 и С-13 аминокислот

11. Определение способности почвенных бактерий к разложению синтетических моющих средств

12. Рост бактерии Basillus subtilis и биосинтез нуклеозида инозина на высоко-дейтерированной среде

13. Химическая структура, биохимические свойства и ферменты бактерий

14. Бактерии: места обитания, строение, процессы жизнедеятельности, значение

15. Біологія та екологія бактеріофагів

16. Екологія бактерій

Противомоскитная сетка, 100х220 см, бежевая.
Материал изготовления: полиэстер 100%, плотность 58 гр/кв. метр. В комплект входят кнопки и двусторонний скотч для крепления к дверному
425 руб
Раздел: Сетки противомоскитные
Фломастеры утолщенные "Jumbo", 24 цвета.
Фломастеры, вентилируемый колпачок, утолщенный трехгранный корпус. В наборе: 24 цвета.
515 руб
Раздел: 13-24 цвета
Музыкальная шкатулка в форме трапеции.
Внутри шкатулки находится фигурка. При заводе шкатулки, фигурка кружится и звучит приятная мелодия. Размер: 13х16х9 см. Шкатулка
697 руб
Раздел: Шкатулки музыкальные

17. Бактерии в организме человека

18. Клінічна характеристика симптоматики та перебігу бактеріальної пневмонії у дітей

19. Химический состав звезд

20. Почва, ее состав и особенности

21. Зажигательные смеси, состав, средства применения и доставки, вызываемые повреждения, методы лечения и защиты

22. Изменение газового состава атмосферы в прошлом и настоящем
23. Особенности и изменение экономико-географического положения РФ
24. Национальный и религиозный состав населения России

25. Изменение географической оболочки при добыче полезных ископаемых на примере Рускеальской мраморной ломки

26. Льготы по налогу на прибыль, динамика их изменений

27. Состав нормативных документов, регламентирующих организацию работы с документами

28. Состав земель населенных пунктов

29. Понятие и состав земель сельскохозяйственного назначения

30. Социально - экономические, политические изменения в СССР в 1953 - 1980 гг.

31. Налоги, их состав и структура

32. Понятие правоспособности, её статусы и изменения

Солнцезащитная рулонная шторка для автомобиля Altabebe, арт. AL7030.
Солнцезащитная рулонная шторка для автомобиля Altabebe AL7030 - аксессуар, который защитит ребенка от ярких солнечных лучей при перевозке
660 руб
Раздел: Прочее
Статуэтка "Маленькая леди", 10 см.
Материал: фарфор. Регулярно удалять пыль или мыть тёплой водой. Товар не подлежит обязательной сертификации.
462 руб
Раздел: Миниатюры
Бумага для принтера "Svetocopy", формат А3, 500 листов.
Офисная бумага для принтера и техники SvetoCopy А3 относится к категории качества C и является самой популярной в офисном классе,
558 руб
Раздел: Формата А3 и больше

33. Трудовые правоотношения: понятие, содержание, основания возникновения, изменения и прекращения

34. Ключи для оксфордской рабочей тетради (Upper-Intermediate)

35. Культурная морфология О.Шпенглера "Закат Европы"

36. Морфология сказки В. Я. Проппа

37. Морфология: шпаргалка для экзамена в школе

38. В.Я. Пропп "Морфология сказки"
39. Россия в годы интервенции и гражданской войны (1918-1920гг.). "Белое движение", его состав и цели
40. Шрифт. Этапы развития и изменения формы

41. Состав и принципы построения ЭВМ

42. Состав и функционирование ИС построенной по принципу "клиент-сервер" для численного обоснования решений

43. Иммунная система. Строение, состав, функции и др.

44. Суды общей юрисдикции, порядок формирования, состав, полномочия

45. Формирование понятия "фермент" в курсе биологии и связь с школьным курсом химии

46. Изменение физических характеристик почв под влиянием антропогенного фактора

47. ИЗМЕНЕНИЕ КАЧЕСТВА ВОДНЫХ РЕСУРСОВ КАЛИНИНГРАДСКОЙ ОБЛАСТИ, В ЗАВИСИМОСТИ ОТ ХАРАКТЕРА ЗАГРЯЗНЕНИЯ (MS Works)

48. Человек как творческий экологический фактор. Основные направления и результаты антропогенных изменений в окружающей среде. Компенсационные механизмы и возможности среды в этих условиях

Записная книга "Bazar", А5, бирюзовая.
Записная книга на резинке. Формат: А5 (130x210 мм). Количество страниц: 192. Основной блок: линейка. Дополнительные разделы: телефоны,
577 руб
Раздел: Записные книжки
Чехол для телефона - кошелек, 14.5x9х3.5 см.
В Вашей необъятной сумке невозможно разыскать телефон или кошелек? Направляясь на ланч или шоппинг, Вам приходится брать с собой массивный
396 руб
Раздел: Сумочки для телефонов
Велосипед трехколесный Moby Kids "Comfort. EVA", цвет: красный.
Детский трёхколёсный велосипед Moby Kids "Comfort 10х8 EVA". В данной модели предусмотрены дополнительные функции и аксессуары,
4216 руб
Раздел: Трехколесные

49. Способности и одаренность в младшем школьном возрасте

50. Проблема школьной неуспеваемости

51. Проблема дислексии у детей младшего школьного возраста

52. Формирование личности в младшем школьном возрасте

53. Наблюдения за изменениями в природе и ведение календарей природы в младших классах вспомогательной школы

54. Социально-психологические особенности профилактики правонарушений среди школьной молодежи
55. Журнал «Школьная библиотека» как источник информации о научно – познавательной книге
56. Методические приемы развития воображения и творческих способностей детей младшего школьного возраста на занятиях кружка декоративно - прикладного искусства по художественной обработке бересты

57. Изменение геополитической системы в Европе в 1990 году

58. Состав бетонных и железобетонных работ (виды опалубки, арматуры ...)

59. Исследование фактических сроков и состав ТР электрооборудования автомобиля КамАЗ-5320

60. Воображение детей школьного возраста

61. Изменение Картины Мира у наркозависимых лиц

62. Символдрама как метод коррекции тревожности у детей младшего школьного возраста

63. Измененные состояния сознания в системе религиозного опыта

64. Социальная динамика и ее проявления в общественных изменениях и процессах

Шкатулка, 36x26x18 см (арт. 3871-RT-64).
Шкатулка очень удобна в использовании, и к тому же станет украшением вашего домашнего интерьера! Модель: 64. Оформление корпуса: ткань,
2717 руб
Раздел: Шкатулки для рукоделия
Простыня на резинке "ЭГО", 160х200 см, бежевая.
Трикотажная простыня "ЭГО" на резинке выполнена из 100% хлопка высокого качества. Натуральный, экологически чистый материал
760 руб
Раздел: Простыни, пододеяльники
Детский велосипед Jaguar трехколесный (цвет: коричневый).
Детский трехколесный велосипед колясочного типа, для малышей от 10 месяцев до 3 лет. Модель с удлиненной рамой, что позволяет подобрать
1440 руб
Раздел: Трехколесные

65. Динамика социо-культурных изменений

66. Билеты по физике за весь школьный курс

67. Влияние изменений окружающей среды на здоровье человека

68. Межпредметные связи в курсе школьного предмета химии на предмете углерода и его соединений

69. Хитин-глюкановый комплекс грибного происхождения. Состав, свойства, модификации

70. Зависимость изменения скорости протекания электролиза от концентрации электролита
71. Состав и формы бухгалтерской отчетности (СКЛАД І ФОРМИ БУХГАЛТЕРСЬКОЇ ЗВІТНОСТІ)
72. Государственный долг: понятие, состав и его обслуживание (по Казахстану)

73. Влияние изменения в структуре предприятия и продукции на стоимостные показатели продукции

74. Анализ структурных изменений в экономике Беларуси при многовекторной интеграции

75. Социальное изменение в современной эре

76. Численность, состав, организационная структура партии Эсеров в начале 1900-х годов

77. Национальный состав Финляндии

78. Изменение политической и социальной структуры Древнего Рима в 1-2 веках н.э.

79. Этнический состав Омской области. О жизни сибирских татар, казахов, русских, украинцев, немцев

80. Старт школьной компьютеризации

Набор чернографитных карандашей для правшей STABILO EASYgraph, 2 штуки.
Первые трехгранные чернографитные карандаши, специально разработанные для левшей и для правшей. Твердость - HB. Карандаши позволяют
347 руб
Раздел: Чернографитные
Фломастеры. CARIOCA, 36 цветов.
Количество цветов: 36. Толщина корпуса: стандартная. Длина корпуса с колпачком: 146 мм. Форма корпуса: круглая. Тип наконечника:
379 руб
Раздел: Более 24 цветов
Шкатулка Jardin D'Ete "Розовая глазурь", 11x10x8 см.
Шкатулка Jardin D’ete превосходно подойдет для хранения украшений. Она исполнена из стекла и металла. Шкатулка сочетает в себе
1077 руб
Раздел: Шкатулки для украшений

81. Изменение качества копченых рыбных товаров при их хранении

82. Об этнографическом аспекте языковых изменений

83. Изменение типа героя в русской литературе (по произведениям А. С. Пушкина, М. Ю. Лермонтова, И. С. Тургенева)

84. Шпаргалка по морфологии

85. Морфо-функциональные изменения тонкой кишки и нутритивная поддержка больных с хронической сердечной недостаточностью

86. Состав крови
87. Изменение частоты сердечных сокращений и артериального давления при работах разной мощности
88. Изменения второго курса ВГМУ в конце и начале семестра и функционального состояния студентов

89. Литература - Гигиена (Гигиеническое значение, состав, свойства атмосферного

90. Изменение глазного дна у новорожденных при нормальных и патологических родах

91. Гигиенические требования, предъявляемые к школьной мебели

92. Изменение организационной структуры предприятия

93. Профессионально – квалифицированный состав и структура кадров. Движение кадров и показатели их оборота

94. Реорганизация бизнес-процессов при изменении информационной системы в крупной организации

95. Конструктор из процессных технологий (как составить план проведения изменений на предприятии)

96. ISO 9000 как инструмент организационных изменений

Пенал "Jungle" с наполнением.
Пенал на 1 отделение укоплектован необходимыми школьными принадлежностями. В комплекте пенала в помощь и на радость школьники найдут
1079 руб
Раздел: С наполнением
Кружка "Peter Rabbit".
Красивая кружка серии "Peter Rabbit" из меламина с изображением кролика из сказки. Удобная, легкая, противоударная. На дне
594 руб
Раздел: Кружки, стаканы, чашки
Детский велосипед Jaguar трехколесный (цвет: синий).
Детский трехколесный велосипед для малышей от 1 года до 3 лет. Трехколесный велосипед колясочного типа с музыкально-световой кнопкой.
1800 руб
Раздел: Трехколесные

97. Механизмы достижения катарсиса у детей младшего школьного возраста на уроках музыки

98. Сроки изменения уплаты налога и сбора

99. Закономерность изменения эффективности накопления сигнала двоичного кода

100. Химический состав молока


Поиск Рефератов на сайте za4eti.ru Вы студент, и у Вас нет времени на выполнение письменных работ (рефератов, курсовых и дипломов)? Мы сможем Вам в этом помочь. Возможно, Вам подойдет что-то из ПЕРЕЧНЯ ПРЕДМЕТОВ И ДИСЦИПЛИН, ПО КОТОРЫМ ВЫПОЛНЯЮТСЯ РЕФЕРАТЫ, КУРСОВЫЕ И ДИПЛОМНЫЕ РАБОТЫ. 
Вы можете поискать нужную Вам работу в КОЛЛЕКЦИИ ГОТОВЫХ РЕФЕРАТОВ, КУРСОВЫХ И ДИПЛОМНЫХ РАБОТ, выполненных преподавателями московских ВУЗов за период более чем 10-летней работы. Эти работы Вы можете бесплатно СКАЧАТЬ.